内容简介
DB21/T 2734.1-2017病菌PCR分型诊断方法第1部分∶ 大肠杆菌PCR检测方法
Method ofPCR typing diagnosis for bacterial Partl: Method of PCR detection for Escherichia coli
2017- 03-23 实施
2017- 02-23 发布
目 次
前言 ................................................................................1
1 范围 .............................................................................. 1
2 规范性引用文件 .................................................................... 1
3 缩略语 ............................................................................ 1
4 原理 .............................................................................. 1
5 仪器和器材 ........................................................................ 1
6 试剂和材料 ........................................................................ 1
7 操作步骤 .......................................................................... 2
7.1 样品的采集、前处理、存放与运输 ................................................ 2
7.1.1 采样注意事项 .............................................................. 2
7.1.2 采样工具 .................................................................. 2
7.1.3 内脏样品的采集与前处理 .................................................... 2
7.1.4 内容物的采集与前处理 ...................................................... 2
7.1.5 粪便的采集与前处理 ........................................................ 2
7.1.6 血液 ...................................................................... 2
7.1.7 大肠杆菌纯培养物 .......................................................... 3
7.1.8 保存与运输 ................................................................ 3
7.2 PCR 检测....................................................................... 3
7.2.1 DNA 提取................................................................... 3
7.2.2 PCR ....................................................................... 3
7.2.2.2 PCR 反应条件........................................................... 3
7.2.2.3 电泳 .................................................................. 4
8 试验成立的条件 .................................................................... 4
9 结果判定 .......................................................................... 4
附录 A（规范性附录） 试剂配制........................................................ 5
A.1 电泳缓冲液（50 倍）............................................................ 5
A.1.1 0.5mol/L 乙二铵四乙酸二钠（EDTA）溶液（pH 8.0） ......................... 5
A.1.2 TAE(三羟甲基氨基甲烷一乙酸)电泳缓冲液(50 倍) ............................... 5
A.2 1%琼脂糖凝胶 .................................................................. 5
前 言
标准《病菌 PCR 分型诊断方法》按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。
标准《病菌 PCR 分型诊断方法》分为两个部分：
——第 1 部分：大肠杆菌 PCR 检测方法；
——第 2 部分：产气荚膜梭菌 PCR 分型检测方法。
本部分为病菌 PCR 分型诊断方法的第 1 部分。
本分由辽宁省动物疫病预防控制中心提出。
本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。
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