NY/T 3468-2019
猪轮状病毒间接ELISA抗体检测方法
Indirect enzyme-linked immunosorbent assay for detection of antibodies against porcine rotavirus
2019-11-01实施
2019-08-01发布
1 范围
本标准规定了猪轮状病毒间接 ELISA抗体检测方法的试剂、仪器和设备、试验程序、试险结果的判定方法以及注意事项。
本标准适用于猪轮状病毒抗体检测，用于猪轮状病毒感染的流行病学调查和分析。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 19489 实验室生物安全通用要求
GB/'T27401 实验室质量控制规范 动物检疫
NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范
中华人民共和国农业部公告第302号 兽医实验室生物安全技术管理规范
3 设备和器材
3.1 辞标测定仪
3.2 恒温培养箱
3.3 冰箱【4℃、-20℃）
3.4 离心机
3.5 微量移液器
量程∶20 μL~200μL、100 μL~1000 μL。
3.6 商标极
3.7 一次性注射器
量程∶5mL。
4 试剂
4.1 猪轮状病毒VP6蛋白
VP6蛋白的表达与纯化见附录A。
4.2 标准阳性血清
猪轮状病毒疫黄免疫仔猪制备，血清经病毒中和试验检测为阳性。
4.3 标准阴性血清
无母源抗体、未免疫猪轮状病毒疫苗的 15 日龄~30 日龄仔猪血清，血清经病毒中和试验检测，中和效价不大于114.
4.4 包被液
配制见附录中的B.1。
4.5 磷酸盐缓冲液（PBS液）
配制见B2。
4.6 洗涤液配制见B3.
4.7 封闭液