NY/T 2288-2021 代替NYfT2288—-2012
黄瓜绿斑驳花叶病毒检疫检测与鉴定方法
Detection and Identification method of Cucumber green mottle mosaic virus
2021-05-07发布
2021-11-01 实施
8.2 快速诊断
快速诊断试纸条或诊断试剂盒检测法见附录C。如采用市售的试纸条或试剂盒。按说明操作。
8.3 酶联免疫吸附测定
黄瓜绿斑经花叶病毒商联免疫吸附测定法见附录 D。如采用市售的试剂盒，按说明操作。
8.4 逆转录聚合酶链式反应检测 RT-PCR）
黄瓜绿斑驳花叶病毒逆转录聚合酶链式反应检测法（RT-PCR）见附录E。如采用市售的试剂盒，按说明操作。
9 结果判定和报告
9.1 结果判定
9.1.1 典型症状
果实发病且符合典型症状，可初步判定。
9.1.2 快速诊断结果
快速诊断试纸条或诊断试剂盒检测结果为阳性的，可判定为高度疑似。
9.1.3 酶联免疫吸附测定法
在阴性对照光密度值OD值≤0.1，且阳性对照OD值大于阴性对照OD值2倍的前提下.样品孔OD 值大于阴性对照（D值2倍时，判定为阳性反应，即样晶带黄瓜绿斑驳花叶病毒。
9. 1.4 逆转录聚合酶链式反应检测（RT-PCR）
观察电泳结果，在阳性对照在654 bp 处有条带出现。且空白，阴性对照无条带出现的前提下，待测样品在 654 bp 处有条带出现，判定为阳性反应，即样品带黄瓜绿斑驳花叶病毒。
9.1.5 结果报告
将鉴定结果填入附录F的植物有害生物样本鉴定报告中。
10 样品处理
检测过程中使用的有关材料和用具，在使用完毕后须进行消毒和除害处理。经检疫鉴定后的种子样品应保存在4 ℃冰箱内，叶片和果实样品应保存在一20 ℃以下6个月备查，，保存期满后，进行灭活处理。
11 档案保存
采样信息、鉴定报告等原始资料妥善保存于植物检疫机构，保存期至少一年。