NY/T 3631-2020
茶叶中可可碱和茶碱含量的测定高效液相色谱法
Determination of theobromine and theophylline in tea-High performance-liquid chromatography
2020-11-01实施
2020-07-27发布
4.11 微孔滤膜;孔径0.45 μm，水相。
5 仪器设备
5.1 高效液相色谱仪∶配备紫外或二极管阵列检测器。
5.2 分析天平∶感量 0.0001g和0.001 g。
5.3 恒温水浴锅;控温精度士1℃。
5.4 离心机∶≥4 000 r/min。
5.5 离心管∶容量 50 mL。
5.6 容量瓶∶容量25 mL。
6 试样制备
茶叶样品按 GB/T 8303 规定制备并测定干物质含量。
7 分析步骤
7.1 提取
称取0.5 g（精确至0.000lg）茶叶试样于50 mL离心管（5.5）中，加入1.0g重质氧化镁（MgO）。加入15mL 70℃水后，置于70℃水浴中，期间不时振荡以保证料液充分接触，浸提 10 min，冷却至室温，4 000 r/min离心10 min，上清液转移至 25 mL容量瓶中。残渣再加入10 mL 70℃水，重复浸提操作一次。合并两次提取的上清液，冷却至室温，用水定容至25 mL。提取液经0.45 μm水系滤膜过滤，供高效液相色谱检测。
7.2 测定
7.2.1 仪器参考条件
a）色谱分析柱∶C18反相色谱柱，4.6 mm×250 mm，5 μm。
b） 色谱柱温度∶40℃。c）检测波长∶271 nm。
d） 进样体积∶20 μL。
c） 流动相;乙腈（4.1）和流动相B（4.8）;
e）​​​​​​​流速及梯度洗脱条件见表1。
f） 流速∶1 mL/min。