NY/T 3860-2021
芹菜抗根结线虫鉴定技术规程
Technical code of practice for identification of celery resistance against root-knot nematode(Meloidogyne spp.)
2021-11-01实施
2021-05-07发布
4.2 接种体分离、保存及制备
4.2.1 接种体分离
采集感染根结线虫的病株，直接挑取根结上的卵块，单卵块接种在感病寄主植物根际土壤中，在25 ℃~28 ℃、土壤相对湿度 70%～80%条件下培养40 d～6）d收集在根系上的卵块，确定分离成功。
4.2.2 接种体繁殖及保存
将根结线虫卵块接种在高感寄主植物的根部，在25 ℃~28℃、土壤相对混度 70%～8%条件下培养，并且每60 d进行一次线虫分离、接种，对根结线虫进行扩繁及保存。
4.2.3 接种体制备
将根结线虫卵块用o.5%次氛酸钠消毒1min~2 mim.然后用灭菌水冲洗3次.卵块转移至100 日标准筛网上。放入培养皿内，加入大约10 ml.灭菌水.使卵块与水面接触。在25℃～28℃下避光解化2d~3 d.收集二龄幼虫，制备每毫升1000条的线虫悬浮液用于接种鉴定。
4.3 接种时期
芹菜苗4叶~5叶期接种。
4.4 接种数量
每株接种根结线虫二铃幼虫1 500条。
4.5 接种方法
接种时，在距芹巢苗主根2.0cm 周围，在三个不同方向各打1个小孔，深度为1cm，分别接种0.5 mL. 线虫悬浮液，并轻压封闭孔口.合计接种线虫!500条/株。每份鉴定材料接种10株简，重复3次。4.6 感病对照
选择病情指数大于60 的芹菜品种作为感病对照，建议可以选择荷兰巨芹、天津实心芹等品种。
4.7 接种后管理
植株在温度2℃左有、相对混度 7o%~80%，自然光照条件下·按则正常生产条件进行管理。
4.8 病情调查
4.8.1 调查时间
接种后 40d左右调查。
4.8.2 调查方法
轻轻挖取芹菜植株根系，并用自来水冲洗于净.检查根结情况。根据具有根结的根系占所有根系的比保确定病情级别划分（见表1）.并将有关信息和统计数据记入附录B。计算病情指数（DI）.计靠公式分烟按画 NY/T 1858.8的规定执行。