ICS 07.140
CCS A 92
中华人民共和国国家标准
GB/T 43240—2023
毛发中55种滥用药物及代谢物检验液相色谱-质谱法
Examination methods for 55 drugs and metabolites in hair samples—Liquid chromatography-mass spectrometry
2023-09-07发布
2024-04-01实施
国家市场监督管理总局
发布国家标准化管理委员会
GB/T 43240—2023
毛发中55种滥用药物及代谢物检验液相色谱-质谱法
1 范围
本文件描述了人体毛发中55种滥用药物及代谢物的液相色谱-质谱(LC-MS)定性和定量检验方法。
本文件适用于人体毛发中55种滥用药物及代谢物的定性分析和定量分析。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GA/T122 毒物分析名词术语
3 术语和定义
GA/T 122界定的术语和定义适用于本文件。
4 原理
以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对毛发中甲基苯丙胺等55种滥用药物及代谢物(具体信息见附录A)进行提取。采用液相色谱-质谱法检测，以保留时间、质谱特征离子对和离子对丰度比作为定性判断依据；以色谱峰面积(或峰面积比值)作为定量依据，采用外标法或内标法进行定量分析。
5 试剂和材料
5.1 试剂
5.1.1 水：GB/T6682,一级。
5.1.2 乙腈：色谱纯。
5.1.3 甲醇：色谱纯。
5.1.4丙酮：分析纯。
5.1.5 含0.01%甲酸的2mmol/L甲酸铵溶液(以配制1000 mL为例):称取甲酸铵0.126 g,加水溶解
后，再加入0.1 mL甲酸，用水稀释至1000 mL,混匀。
5.1.6 标准物质储备液：根据甲基苯丙胺等55种标准物质的纯度和盐型换算后，各称取适量，用乙腈
分别配制成1.0 mg/mL单一标准物质储备液，一18 ℃以下保存，有效期12个月。或采用市售单一标准溶液。
5.1.710μg/mL单一标准工作溶液：准确移取标准物质储备液适量，分别用乙腈配制成10μg/mL的单一标准工作溶液。—18℃以下保存，有效期6个月。试验中所需其他质量浓度的单一标准物质工作溶液均由10 μg/mL的单一标准工作溶液用乙腈稀释得到。
5.1.8 100 ng/mL混合标准物质工作溶液：分别移取10μg/mL单一标准工作溶液适量，用乙腈配制成100 ng/mL的混合标准工作溶液。-18 ℃以下保存，有效期2个月。试验中所需其他质量浓度的混合标准物质工作溶液均由100 ng/mL混合标准物质工作溶液用乙腈稀释得到。
5.1.9 内标储备液：根据甲基苯丙胺-ds等内标物质的纯度和盐型换算后，各称取适量，用乙腈分别配
制成1.0mg/mL内标储备液，-18℃以下保存，有效期12个月，或采用市售单一标准物质溶液。内标物可选择附录B中表B.1给出的组内同位素内标，或选择目标物对应的同位素内标。
5.1.10 20ng/mL内标工作溶液：准确移取内标储备液适量，分别用甲醇配制成20ng/mL的内标工作溶液。现用现配。试验中所需其他质量浓度的内标工作溶液均由内标储备液用甲醇稀释得到。内标工作溶液的质量浓度可根据实际情况调整。
5.2 材料
5.2.1 具盖离心管。
5.2.2 具盖研磨管。
5.2.3容量瓶。
5.2.4有机系微孔滤膜：孔径为0.22 μm。
6 仪器和设备
6.1 液相色谱-质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)。
6.2 研磨仪。
6.3 振荡器。
6.4 电子天平：定性分析用电子天平实际分度值(d)小于或等于0.1 mg,定量分析用电子天平实际分度值(d)小于或等于0.01 mg。
6.5 移液器。
7 操作方法
7.1 定性分析
7.1.1 样品制备
7.1.1.1 检材样品
7.1.1.1.1 清洗
取适量毛发置于具盖离心管中，加入20 mL水，振荡1min,弃去水液，加入20 mL丙酮，振荡1 min,弃去丙酮液，重复使用水和丙酮各清洗一次，清洗后的毛发晾干备用。清洗用水和丙酮体积可根据实际情况调整。
7.1.1.1.2 提取
将7.1.1.1.1中晾干后的毛发剪碎至长度约为1mm,称取20 mg置于具盖研磨管中，加入1 mL甲醇，将毛发研磨至粉末状，静置5min,上清液经有机系微孔滤膜过滤，作为检材样品提取液，供仪器检测。
7.1.1.2 质控样品
取空白毛发样品，按照7.1.1.1.1清洗、晾干，剪碎至长度约为1mm后，平行称取两份，每份约20 mg。分别置于具盖研磨管中，一份作为空白样品，一份添加目标物单一标准工作溶液或混合标准工作溶液，作为添加样品(添加样品的质量分数为0.05ng/mg),与检材样品平行操作，得到空白样品提取液和添加样品提取液，供仪器检测。
空白毛发样品应选择未经染色、涂抹发胶、喷洒定型摩丝等人工处理过的健康志愿者的黑色毛发。
7.1.2 仪器检测
7.1.2.1 仪器条件
以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：
a) 色谱柱：双苯基色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)或其他等效柱；
b)柱温：40 ℃;
c) 进样体积：3 μL;
d) 流动相A:含0.01%甲酸的2 mmol/L甲酸铵溶液；
e) 流动相B:甲醇；
f) 流速：0.30 mL/min;
g) 洗脱方式：梯度洗脱，梯度洗脱条件见表1:
h) 离子源：电喷雾电离(ESI);
i) 扫描方式：正离子扫描；
j) 检测方式：多反应离子监测(MRM);
k)气帘气(CUR):0.21 MPa;
1) 喷雾气(GS1):0.34 MPa;
m)辅助气(GS2):0.38 MPa;
n) 离子源温度：550 ℃;o) 离子源电压：5.5 kV;p) 定性、定量离子和锥孔电压、碰撞能量等MS参考条件见附录B。
表1 梯度洗脱条件
时间
min
流动相A
流动相B