ICS 65. 020
CCS B 05
DB4403
深
圳 市 地 方 标 准
DB4403/T 528—2024
水稻高效诱变育种技术规程
Code of practice for high efficiency mutagenesis breeding in rice
2024-11-15 发布
2024-12-01 实施
深圳市市场监督管理局 发 布
DB4403/T 528—2024
目
次
前言....................................................................................................................................................................... Ⅱ
1
范围................................................................................................................................................................... 1
2
规范性引用文件...............................................................................................................................................1
3
缩略语............................................................................................................................................................... 1
4
术语和定义....................................................................................................................................................... 1
5
仪器与试剂....................................................................................................................................................... 1
6
水稻 EMS 诱变育种程序...................................................................................................................................2
7
供试材料选择...................................................................................................................................................2
8
水稻种子预处理...............................................................................................................................................2
9
EMS 诱变处理....................................................................................................................................................2
10 发芽试验........................................................................................................................................................... 2
11 诱变后代的种植与筛选...................................................................................................................................2
12 优良株系鉴定...................................................................................................................................................3
13 育种档案........................................................................................................................................................... 3
参考文献................................................................................................................................................................. 4
I
DB4403/T 528—2024
前
言
本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件由深圳市市场监督管理局提出并归口。
本文件起草单位：深圳市农业科技促进中心、深圳洁田模式生物科技有限公司。
本文件主要起草人：杨晓怀，唐晓艳，金曼，张维乐，陈子晟，陈雷，曾艳红，李永红，陈红娜，
周志豪，曹孔江，陈敏，鲁勇，刘志宏。
II
DB4403/T 528—2024
水稻高效诱变育种技术规程
1
范围
本文件规定了水稻 EMS 诱变育种涉及的仪器与试剂、水稻 EMS 诱变育种程序、供试材料选择、水稻
种子预处理、EMS 诱变处理、发芽试验、诱变后代的种植与筛选、优良株系鉴定以及育种档案等方面的
技术要求。
本文件适用于利用 EMS 诱变育种技术进行水稻品种选育。
2
规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该
日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 3543.4—1995
农作物种子检验规程
发芽试验
GB 4404.1
粮食作物种子
第 1 部分：禾谷类
3
术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
甲基磺酸乙酯
ethyl methane sulfone
一种强效化学诱变剂，属于烷化剂诱变最常用的一种，需避光保存。
3.2
水稻 EMS 诱变
EMS mutagenesis of rice
利用甲基磺酸乙酯（4.1）处理水稻种子。
4
缩略语
下列缩略语适用于本文件。
EMS：甲基磺酸乙酯（Ethyl Methane Sulfone）
5 仪器与试剂
5.1 仪器设备
仪器包括但不限于以下内容：
a）通风橱；
b）数种设备：数粒板或电子自动数粒仪等；
1
DB4403/T 528—2024
c）发芽器具：发芽箱、发芽室、发芽皿、发芽盘等。
5.2
试剂
EMS、50 mmol 磷酸钠缓冲液（pH7.0）、氢氧化钠或硫代硫酸钠等。
6
水稻 EMS 诱变育种程序
水稻 EMS 诱变育种程序应包括供试材料选择、水稻种子预处理、EMS 诱变处理、发芽试验、诱变后
代的种植与筛选以及优良株系鉴定六个阶段。
7
供试材料选择
应选择符合 GB 4404.1 规定的水稻种子作为供试材料。
8 水稻种子预处理
8.1 水稻种子应在 25～30℃条件下，用清水浸泡 48 小时，每 24 小时换一次水。
8.2 水稻种子浸泡 48 小时后，用清水冲洗干净并稍晾干。
9 EMS 诱变处理
9.1 EMS 处理液应现配现用。应在通风橱中用 50 mmol 磷酸钠缓冲液（pH7.0）配制体积分数为 80 %的
EMS 处理液。
9.2
水稻种子应完全浸没于 EMS 处理液中，并在 28 ℃暗条件下浸泡处理 12 小时，期间每隔 1 小时搅
拌混匀。
9.3
EMS 诱变处理结束后，倒出 EMS 处理液。用清水清洗水稻种子后控干水分，重复不少于 5 次，除
去 EMS 残留。
9.4
EMS 处理液及清洗废水应统一收集并装入废液桶中，可采用氢氧化钠（终浓度 1 mol）中和处理，
并在阳光下暴晒 2～3 天；或 5 %硫代硫酸钠，作为解毒剂和终止剂处理废液。
9.5
废弃物及废液应按照实验室管理要求集中标记存放，并通过具有资质的固废危废处理公司进行回
收处理。
9.6 操作者应穿着实验服，佩戴防护手套、口罩、护目镜等。
10 发芽试验
10.1 按照 GB/T 3543.4-1995 要求，对 EMS 诱变处理后的水稻种子进行发芽试验。
10.2 统计 1000 粒水稻种子的发芽率，每 200 粒水稻种子作为一个样品，做好发芽率结果统计记录。
10.3 经 EMS 诱变后的水稻种子发芽率在 50～70 %范围内，诱变材料可进行苗床播种。
11 诱变后代种植与筛选
11.1 M1代种植
2
DB4403/T 528—2024
诱变后的材料进行苗床播种，秧龄 25～30 天进行单株插秧，行株距 20 cm×20 cm。田间管理按照
当地正常水稻进行，在水稻三叶期至五叶期出现约 1%的白化苗，则诱变成功。成熟后收获水稻种子。
11.2
M2代种植与筛选
种植方法与 M1代相同。根据目标性状筛选变异植株，收获单株水稻种子。
11.3
M3代种植与考察
取 M2代变异水稻种子进行苗床播种，秧龄 25～30 天进行单株插秧，行株距 20 cm×20 cm。田间管
理应按照当地正常水稻进行。考察 M3代目标性状的稳定性。
12 优良株系鉴定 2，3 次重复。通过田间观察和室内
选择目标性状稳定的优良株系鉴定、评比。每个株系种植 150 m
考种评定，筛选出具备目标性状的品系。
13 育种档案
13.1 为提供可追溯证据，应同时建立纸质和电子育种档案，内容包括：水稻品种、诱变剂使用记录、
诱变过程记录、发芽率记录、诱变后代的种植管理记录及优良株系鉴定文件。
13.2
所有记录文件应真实、准确，有专人保管。
3
DB4403/T 528—2024
［1］
［2］
参 考 文 献
GB/T 3543.4—1995 农作物种子检验规程 发芽试验
GB 4404.1 粮食作物种子 第 1 部分：禾谷类
_____________________
A
4