ICS71. 100. 70 CCS Y42
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T2105—2024
代替SN/T2105—2008
进出口化妆品中柠檬黄等8种水溶性
色素的测定方法
Determinationof8water-solubilitycoloursuchastartrazinein
cosmeticsforimportandexport
2024-12-16发布
2025-06-01实施
中华人民共和国海关总署 发 布
SN/T2105—2024
前 言
本文件按照 GB/T1. 1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替SN/T2105—2008《化妆品中柠檬黄和桔黄等水溶性色素的测定方法》,与SN/T2105— 2008相比,主要技术变化如下: ———增加了液相色谱-串联质谱法测定进出口化妆品中柠檬黄等8种水溶性色素的检测方法。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位:中华人民共和国中山海关、中华人民共和国长春海关、中华人民共和国拱北海关。 本文件主要起草人:张宪臣、容裕棠、康明芹、李勇、冯家望。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为: ———2008年首次发布为SN/T2105—2008; ———本次为第一次修订。
Ⅰ
SN/T2105—2024
进出口化妆品中柠檬黄等8种水溶性
色素的测定方法
1 范围
本文件描述了液态水基类、膏霜乳液类、粉类进出口化妆品中八种水溶性色素樱桃红、食品红17、
柠檬黄、橘黄、苋菜红、胭脂红、靛蓝、亮蓝的液相色谱和液相色谱-串联质谱测定方法。
本文件适用于液态水基类、膏霜乳液类、粉类进出口化妆品中8种水溶性色素樱桃红、食品红17、
柠檬黄、桔黄、苋菜红、胭脂红、靛蓝、亮蓝的测定。
本文件的液相色谱-串联质谱法为仲裁法。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文
件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于
本文件。
GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
第一法 液相色谱法
4 原理
用水提取化妆品中的水溶性色素,提取液经离心过滤后,用高效液相色谱法进行测定。根据其保留
时间定性,外标法定量。
5 试剂和材料
除非另有说明,在分析中所用试剂均为分析纯和 GB/T6682规定的三级水。 5. 1 甲醇:高效液相色谱级。 5. 2 乙酸铵。 5. 3 樱桃红标准物质:纯度≥97%。 5. 4 食品红17标准物质:纯度≥97%。 5. 5 柠檬黄标准物质:纯度≥97%。 5. 6 橘黄标准物质:纯度≥97%。 1
标准
SN/T2105—2024
5. 7 苋菜红标准物质:纯度≥97%。 5. 8 胭脂红标准物质:纯度≥97%。 5. 9 亮蓝标准物质:纯度≥97%。 5. 10 靛蓝标准物质:纯度≥97%。 5. 11 水溶性色素标准储备液:准确称取适量水溶性色素(精确至0. 0001g),以水配制成质量浓度均为 1000μg/mL 的标准储备溶液。根据需要用水稀释成适用浓度的标准工作溶液。冰箱冷藏保存,有效 期1个月。 5. 12 0. 45μm 水性滤膜。
6 仪器与设备
6. 1 高效液相色谱仪:配有二极管阵列检测器或紫外检测器。 6. 2 微量进样器:10μL。 6. 3 超声波清洗器。 6. 4 离心机:大于5000r/min。 6. 5 溶剂过滤器。
7 测定步骤
7. 1 试样处理 7. 1 液体样品 称取化妆品试样约1g(精确至0. 0001g),置于50mL 具塞锥形瓶中,加入15mL水,在超声波清 洗器中超声提取20min,提取液移入25mL容量瓶中,用水稀释至刻度,混匀,经滤膜(5. 12)过滤,所得 滤液供液相色谱测定。
7.
2 固体样品
称取化妆品试样约1g(精确至0. 0001g),置于50mL 具塞锥形瓶中,加入15mL水和3g氯化钠 固体,在超声波清洗器中超声提取20min,提取液过滤,用水定容至25mL,经滤膜(5. 12)过滤,所得滤 液供液相色谱测定。 7. 2 测定 7. 1 色谱条件 色谱条件如下: a) 色谱柱:KromasilC18250mm×4. 6mm(内径),5μm(粒径),或相当者; b) 流动相 A:甲醇; c) 流动相 B:0. 005mol/L 乙酸铵; d) 流动相梯度(见表1);
2
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表1 流动相梯度程序
时间/min 流动相 A(体积分数)/% 流动相 B(体积分数)/%
0 10 90
2 20 80
6 98 2
10 98 2
13 10 90
e) 流速:1. 0mL/min; f) 检测波长:樱桃红、食品红17、柠檬黄、橘黄、苋菜红、胭脂红、靛蓝:254nm;亮蓝:630nm; g) 柱温:室温; h) 进样量:10μL。 7. 2 标准工作曲线绘制 用水溶 性 色 素 标 准 储 备 液 (5.11)分 别 配 制 成 质 量 浓 度 为 0.5 mg/L、1.0 mg/L、5.0 mg/L、 10. 0mg/L、20. 0mg/L、50. 0mg/L、100. 0 mg/L 的混合标准工作溶液,分别取 10μL 注入液相色 谱 仪,按色谱条件(7. 2. 1)进行测定,以色谱峰的峰面积为纵坐标、与其对应的浓度为横坐标作图,绘制标 准工作曲线。在上述 仪 器 条 件 下 (7. 2. 1)柠 檬 黄 的 保 留 时 间 约 为 4. 4 min,苋 菜 红 的 保 留 时 间 约 为 1min,靛蓝的 保 留 时 间 约 为 5.9 min,胭 脂 红 的 保 留 时 间 约 为 6.2 min,橘 黄 的 保 留 时 间 约 为 6. 6min,食品红17的保留时间约为6. 9 min,亮蓝的保留时间约为7. 3 min,樱桃红的保留时间约为 8. 4min,水溶性色素标准物种类表和色谱图见附录 A 中表 A. 1、图 A. 1。 7. 2. 3 试样测定 用微量进样器准确吸取10μL试样溶液(7. 1)注入液相色谱仪,按色谱条件(7. 2. 1)进行测定,记录 色谱峰的保留时间和峰面积。待测物质含量高,样液超过线性范围的,可用水稀释后进行测定。 7. 3 空白试验 除不称取试样外,均按上述步骤进行。
8 结果计算
结果按式(1)计算: X =ρ×V m ×1000 ………………………… (1) 式中: X ———化妆品中待测物质的量,单位为毫克每千克(mg/kg); ρ ———从标准工作曲线上查出的试样溶液中水溶性色素的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L); V ———试样定容体积,单位为升(L); m ———试样的质量,单位为克(g)。
3
标准
SN/T2105—2024
9 定量限
本方法对亮蓝定量限为2. 5mg/kg,对樱桃红、食品红17、柠檬黄、橘黄、苋菜红、胭脂红和靛蓝定量 限为10mg/kg。
第二法 液相色谱-串联质谱法
10 原理
用乙醇水溶液提取化妆品中的水溶性色素,提取液经离心过滤后,用高效液相色谱-质谱联用仪进
行测定。采用多监测扫描模式(MRM),以碎片的丰度比定性,标准样品定量离子外标法定量。
11 试剂和材料
除非另有说明,在分析中所用试剂均为分析纯和 GB/T6682规定的三级水。 11. 1 甲醇:色谱纯。 11. 2 乙醇:分析纯。 11. 3 乙醇水溶液:移取500mL乙醇,加水定容至1L。 11. 4 乙酸铵:分析纯。 11. 5 10mmol乙酸铵溶液:称取0. 77g乙酸铵,加水定容至1L。 11. 6 樱桃红标准物质:纯度≥97%。 11. 7 食品红17标准物质:纯度≥97%。 11. 8 柠檬黄标准物质:纯度≥97%。 11. 9 橘黄标准物质:纯度≥97%。 11. 10 苋菜红标准物质:纯度≥97%。 11. 11 胭脂红标准物质:纯度≥97%。 11. 12 亮蓝标准物质:纯度≥97%。 11. 13 靛蓝标准物质:纯度≥97%。 11. 14 水溶性色素标准储备液:准确称取适量水溶性色素(精确至0. 0001g),以水配制成质量浓度均 为1μg/mL的标准储备液。根据需要用水稀释成适用浓度的标准工作溶液。冰箱冷藏保存,有效期 1个月。 11. 15 0. 22μm 聚醚砜微孔滤膜。
12 仪器与设备
12. 1 高效液相色谱-串联质谱仪,配有电喷雾离子源(LC-MS/MS)。 12. 2 天平:感量0. 0001g和0. 01g。 12. 3 高速冷冻离心机:15000r/min。 12. 4 振荡器。 12. 5 涡旋混和器。 12. 6 超声波清洗器。
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SN/T2105—2024
13 测定步骤
13.
1 试样处理
13.
1 液体样品
称取化妆品试样1g(精确至0. 0001g),置于15mL具塞离心管中,加入9mL乙醇水溶液(11. 3),涡 旋混匀,在超声波清洗器中超声提取20min,5000r/min离心10 min,上清液移入另一15 mL具塞 离心管中,用水定容至10mL,混匀,经滤膜(11. 15)过滤,所得滤液供高效液相色谱-质谱联用仪进行 测定。
13.
2 固体样品
称取化妆品试样 1g(精确至 0. 0001g),置 于 15 mL 具 塞 离 心 管 中,加 入 10 mL 乙 醇 水 溶 液 (11. 3)和2g氯化钠固体,涡旋混匀,在超声波清洗器中超声提取20min,5000r/min离心10min,上 清液移入另一15 mL 具塞离心管中,用水定容至10 mL,混匀,取适量液体至 2 mL 高速离心管中, 15000r/min离心10min,经滤膜(11. 15)过滤,所得滤液供高效液相色谱-质谱联用仪进行测定。
14 测定
14. 1 色谱条件 色谱条件如下: a) 色谱柱:KromasilC18250mm×4. 6mm(内径),5μm(粒径),或相当者; b) 柱温:25 ℃; c) 进样量:10μL; d) 流动相:A 为10mmol乙酸铵溶液,B为乙腈; e) 梯度洗脱程序见表2。
表2 流动相梯度洗脱程序
时间/min A/% B/% 流速/(μL/min)
0 95 5 200
3 20 80 200
5 20 80 200
5. 01 95 5 200
10 95 5 200
14. 2 质谱条件 质谱条件如下: a) 离子化模式:电喷雾电离正离子模式(ESI+); b) 扫描模式:多反应监测(MRM); c) 离子源电压(IS):4500V; d) 气帘气压力:241kPa; 5
标准
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e) 辅助气压力:207kPa; f) 离子源温度:600 ℃; g) 质谱采集参数条件见 A. 2。 14. 3 标准曲线的绘制 取适量水溶性色素标准储备液(5. 11)用水分别配制成质量浓度为1. 0μg/L、10. 0μg/L、20. 0μg/L、 50. 0μg/L、100. 0μg/L、200. 0μg/L、500. 0μg/L的标准工作液,浓度由低到高进样检测,以色谱峰峰面 积为纵坐标、与其对应的质量浓度为横坐标作图,绘制标准工作曲线。水溶性色素标准物种类表、标准 离子流图和质谱图见附录 A、附录 B。 14. 4 定性测定 在相同试验条件下,样品中待测物与标准溶液的标准物质保留时间偏差在±2. 5%之内;且样品质 谱图在扣除背景后,定性离子的相对丰度与标准溶液谱图中定性离子的相对丰度一致,偏差不超过规定 的范围,则可判定为样品中存在待测色素,相对丰度规定范围见 A. 3。 14. 5 定量测定
外标法定量,定量离子采用丰度最大的二级特征离子碎片,见附录 B。
14.
6 空白试验
除不加试样外,均按上述测定步骤进行。
15 结果计算
按式(2)计算。计算结果需扣除空白值,结果保留2位有效数字。
Xi =ρi ×V
………………………… (2)
m
式中:
Xi———试样中待测组分残留量,单位为微克每千克(μg/kg)。
ρi ———样品制备中待测组分的质量浓度,单位为纳克每毫升(ng/mL)。
V ———试样定容体积,单位为毫升(mL)。
m ———试样称样量,单位为克(g)。
16 定量限
本方法对进出 口 化 妆 品 中 柠 檬 黄 等 8 种 水 溶 性 色 素 化 合 物 检 出 限 为 0. 03 mg/kg,定 量 限 为 0. 1mg/kg。
17 允许差
在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。
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附 录 A
(资料性)
进出口化妆品中8种水溶性色素化合物相关信息
A1 水溶性色素化合物信息如表 A.所示。
表 A.
1 水溶性色素化合物信息
名称 色号(C. I.) CAS号 英文名称 化学式 相对分子质量
柠檬黄 19140 1932-21-0 Tartrazine C16H9O9N4S2Na3 534. 4
苋菜红 16185 915-67-3 Amaranth C20H11N2Na3O10S3 604. 5
胭脂红 16255 2611-87-2 Ponceau4R C20H11N2Na3O10S3 6045.
靛蓝 73015 860-22-0 FoodBlue1 C16H8N2Na2O8S2 466. 4
桔黄 15985 2783-94-0 SunsetYellow C10H10N2O7S2Na2 452. 4
食品红17 16035 25956-17-6 FancyRed C18H14N2Na2O8S2 496. 4
亮蓝 42090 3844-45-9 Erioglaucine disodiumsalt C37H34N2Na2O9S3 792. 8
樱桃红 45430 568-63-8 FoodRed14 C20H6I 4Na2O5 8799.
A.
2 水溶性色素化合物参考质谱参数如表 A.
2所示。
表 A.
2 水溶性色素化合物参考质谱参数
名称 保留时间/min 离子化模式 定量离子对 m/z 定性离子对 m/z 锥孔电压/V 碰撞能量/V
柠檬黄 3. 60 ESI+ 469. 2/451. 0 469. 2/451. 0 47 23
469. 2/200. 2 47 38
苋菜红 3. 65 ESI+ 539.0/3483. 539. 0/348. 3 36 42
539. 0/223. 1 36 33
胭脂红 3. 81 ESI+ 539. 0/223. 1 539. 0/223. 1 41 33
539. 0/158. 2 41 40
靛蓝 3. 59 ESI+ 423.1/3421. 423. 1/342. 1 21 45
423. 1/205. 1 23 55
桔黄 3. 91 ESI+ 409. 2/236. 0 409. 2/236. 0 20 28
409. 2/173. 2 20 31
食品红17 3. 98 ESI+ 453. 1/217. 3 453. 1/217. 3 39 35
453. 1/202. 2 39 59
亮蓝 4. 15 ESI+ 749. 0/306. 1 749. 0/306. 1 14 62
749. 0/171. 0 14 71
樱桃红 4. 45 ESI+ 836. 6/582. 9 836. 6/582. 9 27 67
836. 6/329. 2 27 83
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标准
SN/T2105—2024
A.
3 定性监测离子相对丰度最大允许偏差如表 A.
3所示。
表 A.
3 定性监测离子相对丰度最大允许偏差
相对离子丰度 >50% >20%~50% >10%~20% ≤10%
最大允许偏差 ±20% ±25% ±30% ±50%
A. 4 水溶性色素标准物的液相色谱图如图 A. 1所示。 标引序号说明: 1———柠檬黄; 2———苋菜红; 3———靛蓝; 4———胭脂红; 5———橘黄; 6———食品红17; 7———亮蓝; 8———樱桃红。
图 A.
1 水溶性色素标准物的液相色谱图
A.
5 水溶性色素标准物的液相色谱-串联质谱总离子流图如图 A.
2所示。
图 A.
2 水溶性色素标准物的液相色谱-串联质谱总离子流图
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SN/T2105—2024
附 录 B
(资料性)
进出口化妆品中8种水溶性色素化合物二级质谱图
进出口化妆品中8种水溶性色素化合物二级质谱图见图 B.
1~图 B.
8。
图 B.
1 柠檬黄二级质谱图
图 B.
3 胭脂红二级质谱图
图 B.
5 橘黄二级质谱图
图 B.
2 苋菜红二级质谱图
图 B.
4 靛蓝二级质谱图
图 B.
6 食品红17二级质谱图
9
标准
SN/T2105—2024
图 B.
7 亮蓝二级质谱图
图 B.
8 樱桃红二级质谱图
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