ICS 07.080
CCS
B20/39
ZHYX
天 津 市 整 合 医 学 学 会 团 体 标 准
T/ZHYX 001—2024
临床用人经血来源子宫内膜再生细胞制备
通用要求
2024 - 07 - 27 发布
2024 - 08 - 01 实施
天津市整合医学学会 发 布
T/ZHYX 001—2024
目
次
前
言 ........................................................................... II
1 范围 ................................................................................ 1
2 规范性引用文件 ...................................................................... 1
3 术语和定义 .......................................................................... 1
4 缩略语 .............................................................................. 1
5 一般要求 ............................................................................ 2
5.5 样本采集与运输 .................................................................. 2
5.5.1 供者筛选和知情同意要求 ...................................................... 2
5.5.2 样本采集要求 ................................................................ 2
5.5.3 样本运输要求 ................................................................ 2
5.6 原代分离 ........................................................................ 2
5.6.1 采集物入场 .................................................................. 2
5.6.2 污染防控要求 ................................................................ 2
5.6.3 工艺要求 .................................................................... 3
5.7 传代 ............................................................................ 3
5.7.1 工艺要求 .................................................................... 3
5.7.2 细胞质量要求 ................................................................ 3
5.8 主库与工作库 .................................................................... 3
5.8.1 工艺要求 .................................................................... 3
5.8.2 细胞质量要求 ................................................................ 3
5.8.3 长期稳定性要求 .............................................................. 4
5.9 制剂 ............................................................................ 4
5.9.1 工艺要求 .................................................................... 4
5.9.2 质量保证要求 ................................................................ 4
I
T/ZHYX 001—2024
前
言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件由天津市整合医学学会提出并归口。
本文件由天津市整合医学学会干细胞与转化医学专业委员会承办。
本文件起草单位：天津医科大学总医院、天津大学化工学院、中国医学科学院血液病医院/血液学
研究所、南开大学生命科学学院、内蒙古医科大学附属医院、天津浩博生物科技有限公司、天泽福瑞（天
津）科技股份有限公司。
本文件主要起草人：王浩、张育淼、戴向晨、邵英起、杨军、任少华、董昌吉、邱克。
II
T/ZHYX 001—2024
临床用人经血来源子宫内膜再生细胞制备通用要求
1 范围
本文件规定了临床用人经血来源子宫内膜再生细胞制备的一般制备要求及质量标准，描述了相应的
方法。
本文件适用于临床用人经血来源子宫内膜再生细胞的制备。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
中华人民共和国药典（2020版）
药品生产质量管理规范（2010版）
ICH Q8 Pharmaceutical Development
ICH Q9 Quality Risk Management
ICH Q10 Pharmaceutical Quality System
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 人经血来源子宫内膜再生细胞
是从女性月经血中提取的，具有多向分化潜能的间充质干细胞。其具有很强的增殖能力，在体外倍
增时间为数小时，在多次传代下仍能保证细胞核型和染色体稳定，有定向趋化能力，也可分化为多种功
能性细胞，可调节免疫反应并以旁分泌途径分泌各种生物活性成分，促进组织和细胞再生。
3.2 主细胞库 master cell bank
样本经原代培养扩增至一定水平（P2-P4代），经一次制备获得的、性质均一的细胞群体。
3.3 工作细胞库 working cell bank
样本由主细胞库经培养扩增至一定水平（P5-P8代），经一次制备获得的、性质均一的细胞群体。
4 缩略语
GMP：药品生产质量管理
HIV1/2 人类免疫缺陷病毒
HAV 人甲肝病毒
HBV 人乙肝病毒
HCV 人丙肝病毒
HCMV 人巨细胞病毒
EBV 人嗜淋巴性疱疹病毒
HPV 人乳头瘤病毒
HHV6/7/8 人疱疹病毒
HB19 人细小病毒
HTLV1/2 人嗜T细胞病毒
TP 梅毒螺旋体
1
T/ZHYX 001—2024
5 一般要求
5.1 人经血来源子宫内膜再生细胞制备所需的各种资源，如厂房及其配备的生产设施、设备应符合 GMP
和工艺要求，并在生产的每一阶段确保产品和物料免受微生物污染和交叉污染。
5.2 建立针对试剂、物料及供应商的管理制度，定期开展针对试剂的适用性检查和针对供应商的评审。
工艺流程中所使用的培养基、细胞因子、消化酶以及各种生产耗材，应选择具有相关资质的产品。
5.3 生产工艺和检验方法需要经过确认和验证，以确保有关操作的关键要素能够得到有效控制。
5.4 建立能够有效运行的质量管理体系，完备质量管理体系的文件系统，并基于风险管理、纠正和预
防以及偏差管理保持质量管理体系的持续改进。
5.5 样本采集与运输
5.5.1 供者筛选和知情同意要求
5.5.1.1 建立供者筛选标准和程序，筛选内容包括但不限于年龄、健康状况（吸烟、饮酒史等）、既
往辐射暴露、危险疫区停留情况、既往病史（严重传染性疾病，妇科、内分泌疾病史等）、家族史（明
确遗传性疾病等）、6-磷酸葡萄糖脱氢酶、谷丙转氨酶、病原微生物等。
5.5.1.2 建立供者知情同意与保密程序，确保符合伦理及法规要求。知情同意应简单易懂，其内容包
括采集样本的目的和用途、采集标本过程的可能风险及报酬情况等。确保任何可以识别供者身份的信息
不会透露给生产流程以外的人员。
5.5.1.3 记录和保存供者的知情同意书、健康调查表、月经血采集记录等资料。
5.5.2 样本采集要求
5.5.2.1 样本采集过程涉及的相关人员应经过严格培训，培训应有记录。
5.5.2.2 建立完备信息数字化管理制度，对样本赋唯一二维码标识，确保样本信息可溯源。
5.5.2.3 生物样本的采集方法需经过研究和验证。
5.5.2.4 样本保护液的成分、保存方式及有效期应经过验证。
5.5.2.5 在采集前，相关人员应对供者进行必要的培训，确保供者知悉并掌握采集样本的标准方法及
注意事项，最大限度保证样本无菌，降低污染发生率。
5.5.3 样本运输要求
5.5.3.1 样本运输人员应经过严格培训，培训应有记录。
5.5.3.2 样本运输须采用平稳、安全、快速的运输途径，运输过程中须防渗漏、防辐射、抗震动等。
5.5.3.3 样本运输装置性能、运输时间应确认及验证。对样本运输应制定规范及应急预案，并对样本
运输全程做记录，包括但不限于运输的方式、条件、路径、时间、人员、地址及样本信息，相关记录入
档案保留。
5.6 原代分离
5.6.1 采集物入场
5.6.1.1 建立采集物接收及废弃限度验证标准及程序（包括温度监控记录、包装完整无损、标签内容
完整、供者临床检验报告等）。
5.6.1.2 核对采集、运输记录，填写样本交接记录，完成样本接收。
5.6.2 污染防控要求
5.6.2.1 取样本进行人源病毒检测，包括 HIV1/2、HAV、HBV、HCV、HCMV、EBV、HPV、HHV6/7/8、HB19、
HTLV-1/2、TP，以及人多瘤病毒、人腺病毒等。
5.6.2.2 采集物容器经消毒进入风险操作区，风险操作区应配备独立外排空调，人物流避免与其他区
域交叉。
5.6.2.3 在人源病毒检测结果出来之前，在风险操作区处理样本。
5.6.2.4 原代分离及培养使用的培养基、PBS 缓冲液均应添加抗生素（双抗+两性霉素 B）。
5.6.2.5 进行细菌、真菌、分枝干菌、支原体检测。
2
T/ZHYX 001—2024
5.6.3 工艺要求
5.6.3.1 构建标准化人经血来源子宫内膜再生细胞原代分离操作程序，制定合适的工艺参数和质量标
准，确保对每一过程的有效控制。
5.6.3.2 制备规程需进行全面的工艺研究和验证，并定期审核和修订。
5.6.3.3 原代分离方法应尽量减小操作带来的差异，建立与原代收获时间、细胞得率等条件相关的工
艺空间范围.
5.6.3.4 应当构建试剂与物料管理系统规程，确保试剂与物料的正确接收、贮存、发放、使用和发运，
防止污染、交叉污染、混淆和差错。
5.7 传代
5.7.1 工艺要求
5.7.1.1 应建立、实施、验证、记录和维护人经血来源子宫内膜再生细胞的传代培养规程，涵盖详细
的生产步骤和工艺参数说明(如物料的核对、预处理、加入物料的顺序、混合时间、温度等)。
5.7.1.2 应保证传代规程的稳健性。确保操作人员具有合格资质并受过相关培训，能够按照操作规程
正确操作；确保选择经质量管理部门批准的供应商，维护并执行试剂及物料管理系统，定期开展必要的
质量及适用性检查。
5.7.1.3 生产工艺规程应在持续的验证中积极更新。结合多批次工艺参数和质量属性，着重缩小批次
间质量差异，对操作方法和条件参数进行反复论证，通过统计分析结果，制定关键工艺步骤、工艺参数、
过程控制参数和可接受标准。
5.7.1.4 正式生产中应当严格采用经过验证的生产工艺、操作规程和检验方法。
5.7.1.5 生产规模应当与设备、人员及产品性质相符（产量恒定性方面的数据）。
5.7.2 细胞质量要求
5.7.2.1 针对初始细胞量、培养基量及种类、培养时间、操作步骤（细胞融合度、传代密度、传代次
数、细胞合并规则）、最大传代次数（实际生产扩增代次的 3 倍以上）等条件进行探究性实验，建立基
于群体倍增时间、流式表型和免疫调控功能等参数的评价体系。
5.7.2.2 培养容器、添加物及其添加条件（时间、温度）、培养条件（pH 值、温度、湿度、气体组成、
培养时间）、消化孵育时间、洗涤次数（残留验证）、温度、离心速度、离心时间等进行研究。
5.7.2.3 对细胞活力（活细胞率、传代代次、倍增时间），细胞特性（形态、表型和基因型、分化能
力、生物学有效性功能）、纯度等工艺质量考察因素进行研究。
5.8 主库与工作库
5.8.1 工艺要求
5.8.1.1 应建立包含细胞从入库、冷冻、深低温保藏到出库完整过程的质量管理和控制体系，制定质
量方针及质量目标，并定期针对质量管理体系的有效性和适用性进行确认和验证。
5.8.1.2 根据细胞的预期用途进行功能研究，探明作用机制，持续监控细胞基因型、表型和功能变化，
通过建立过程分析与产品质量趋势统计策略，基于风险管理，以临床有效性为导向，制定质量标准限度
（控制限、放行限、监管限）。
5.8.1.3 应依照符合细胞贮存的要求建设硬件设施，并设置功能区（细胞操作区、质量控制区、深低
温保藏区、医疗废物存放区等）。
5.8.2 细胞质量要求
5.8.2.1 细胞鉴别：包括细胞形态、细胞表面标志物、人源 STR 图谱分析、染色体核型分析等。
5.8.2.2 细胞活性检测：细胞数和细胞活率（冻存前后）、群体倍增时间和生长曲线、细胞周期分析
等。
5.8.2.3 微生物安全性：细菌、真菌、支原体、分支杆菌、内毒素、细胞内外源病毒检测等。
5.8.2.4 生物学安全性：端粒酶活性、软琼脂克隆形成率、裸鼠皮下接种试验、裸鼠体内接种试验等。
3
T/ZHYX 001—2024
5.8.2.5 生物学有效性：淋巴细胞增殖抑制试验、特定淋巴细胞亚群检测（Th1、Th17、Treg）、抑制
淋巴细胞分泌 TNF-α试验、三系分化（成骨、成脂、成软骨）、功能性蛋白分泌检测等。
5.8.3 长期稳定性要求
5.8.3.1 应依据主库、工作库细胞质量要求制定详细的细胞库质量标准，严格执行并定期开展质量检
测，尤其针对细胞活性、微生物安全性及生物学有效性进行质量评价，以保证长期存储条件下细胞质量
的稳定性。
5.8.3.2 质量管理系统应涵盖细胞库的稳定性维持，应设有专门的质量管理部门制定相关文件及细则，
实施、监督和维护上述相关程序，兼有风险评估、预防及处理举措，确保主库、工作库细胞质量的长期
稳定。
5.9 制剂
5.9.1 工艺要求
5.9.1.1 应制定人经血来源子宫内膜再生细胞制剂制备工艺的标准操作流程及每一过程的标准操作程
序并定期审核和修订。
5.9.1.2 结合剂型、用法和给药途径，进行处方筛选和优化（细胞浓度、数量、装量，均匀度），确
保剂型选择合理、处方合理、制剂工艺稳定。
5.9.1.3 应建立细胞人经血来源子宫内膜再生细胞制剂的质量检查系统，以保证产品的有效性、安全
性和稳定性。
5.9.2 质量保证要求
5.9.2.1 制剂储存稳定性：评价 4℃条件下，24h 内制剂的外观、性状、可见异物、pH、渗透压、细胞
数、细胞活率变化情况。
5.9.2.2 制剂使用稳定性：评价室温条件下，4h 内制剂的外观、性状、可见异物、pH、渗透压、细胞
数、细胞活率变化情况。
4