ICS11.080.20 CCSC50
GB
中华人民共和国国家标准
GB/T39873—2021
消毒剂中季铵盐的测定液相色谱-串联质谱法
Determination of quaternary ammonium salt in disinfectant-
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
2021-03-09发布
2021-10-01实施
国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会
发布
O GB/T39873—2021
前 言
本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由全国质量监管重点产品检验方法标准化技术委员会（SAC/TC374)提出并归口。 本文件起草单位：上海市质量监督检验技术研究院、中检华纳（北京）质量技术中心有限公司、无限
极（中国）有限公司、广州中科检测技术服务有限公司、中国检验认证集团广西有限公司、江苏天瑞仪器股份有限公司、广东洛斯特制药有限公司、华纳通标（北京）认证有限公司。
本文件主要起草人：刘洋、郑国建、杨晋青、翁史昱、林毅侃、戴彦韵、杨保刚、施敬文、毛旭峰、孟杰、 孙红梅、徐树兰、蒙丽琼、周立、蔡潮明、陈冬阳。
工 GB/T39873—2021
消毒剂中季铵盐的测定液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了液相色谱-串联质谱法测定消毒剂中季铵盐的试剂和材料、仪器和设备、测定步骤、结果计算、精密度、检出限和定量限。
本文件适用于消毒剂中十二烷基二甲基基氯化铵（C12-BAC)、十四烷基二甲基苄基氯化铵（C14 BAC)、十六烷基二甲基基氯化铵（C16-BAC)、二癸基二甲基氯化铵(DDAC)、十二烷基三甲基溴化铵 (DTAB)、十二烷基二甲基-2-苯氧基-乙基漠化铵（EDDAB)的测定。
2 2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件，不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
样品经含0.5%甲酸的甲醇溶液超声提取、涡旋、离心，0.22μm的有机滤膜过滤，试液用液相色谱串联质谱测定，保留时间和相对离子对丰度定性，外标法定量。
5 试剂和材料
除非另有规定，仅使用色谱纯试剂。 5.1水：GB/T6682，一级。 5.2乙睛(CH，CN)。 5.30.5%甲酸的甲醇溶液：移取5mL甲酸于1000mL容量瓶中，甲醇定容。 5.40.1%甲酸溶液：移取1mL甲酸于1000mL容量瓶中并用水定容。 5.5季铵盐标准品：十二烷基二甲基苄基氯化铵、十四烷基二甲基基氯化铵、十六烷基二甲基芋基氯化铵、二葵基二甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十二烷基二甲基-2-苯氧基-乙基溴化铵，纯度不小于99.0%，CAS号、分子式、相对分子质量参见附录A。 5.6季铵盐标准储备液，100mg/L：准确称取各季铵盐标准品（5.5)10mg，精确到0.1mg，于100mL 的容量瓶中，用0.5%甲酸的甲醇溶液（5.3)溶解并定容至刻度。
季铵盐标准储备液在一18℃下保存，贮存期6个月。
1 GB/T39873—2021 5.7 标准工作溶液：用0.5%甲酸的甲醇溶液（5.3)将上述标准储备液（5.6)分别配成一系列质量浓度为 0.050mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L、0.500mg/L、1.00mg/L的标准工作溶液，现用现配。 5.8 3滤膜：0.22um，有机膜。
6 仪器和设备
6.1 液相色谱-串联质谱仪，配电喷雾离子源。 6.2 分析天平，感量为0.001g和0.0001g。 6.3 超声振荡器。 6.4 离心机，转速大于或等于8000min。 6.5 涡旋振荡器。
7 测定步骤 7.1 样品处理
称取样 品1g精确至0.001g），液休体样品取样1mL，于100mL容量瓶中，加70mL0.5%甲酸的甲醇溶液（ 3），满旋混合 mim，超声提取20用059甲酸的甲醇溶液（5.3）定容至刻度。取部分样液，于 000 min离心 10mi经0.22um减膜过滤，滤液作为待测样液备用。 若被测组分含量较高，可用 5% 甲酸的甲醇溶波（5.3）稀释后 经022滤膜过滤，法液作为待测样液备用 7.2 测定条件 7.2.1 液相色谐参考条件
设备 不同，测定条件可能不同，以下测定条件经证实是可行的， a) 色替柱Chs，50mmx×21mm（粒径1品，或其他性能相当者 b) 流速：0.3mL/min c) 柱温35℃ d) 进样量uL e) 流动相：溶 剂A：2腈（5.2)，溶剂B：0.1%甲酸溶液（5.4）； f) 液相色谱梯度洗脱条件见表1。
表1液相色谱洗脱条件
0.1%甲酸溶液
时间 min 0.0 1.0 5.0 8.0 8.1 10
乙睛 % 40 40 100 100 40 40
% 60 60 0 0 60 60
2 GB/T39873—2021
7.2.2 2质谱参考条件
设备不同，测定条件可能不同。以下测定条件经证实是可行的：
电离方式：电喷雾电离，正离子； b) 检测方式：多反应监测； c) 毛细管电压：3000V； d) 雾化气温度：450℃； e) 雾化气流速：800L/h； f) 锥孔气流速：150L/h；
a)
离子源温度：150℃。 监测离子对、碰撞能量和锥孔电压参见表
g)
表2 多反应监测条件
锥孔电
碰撞能量
定性离子对m/z 定量离子对m/z
化合物 称
ev 25 20 30 20 50 20 25 30 20 25 25 23
V
304/91 804212
十二烷基二 甲基芊基氯化铵
49
十四烷基二甲基华基氯化铵
2/240 360/91
十六烷基二甲基基氯化铵
/268 32611 3267184
二葵基上甲基氯化铵
30
228/60
十二烷基三 甲基漠化铵
228/43 334/72 334/166
十二烷基二甲基-2 芝氧基
334/72
乙基溴化铵
7.3 标准工作曲线绘制
按7.2的测定条件，分别吸取1μL标准工作溶液（5.7)按浓度由低到高进样测定，以定量离子对的峰面积为纵坐标，对应的溶液浓度为横坐标，得到标准曲线回归方程。
标准物质季铵盐的液相色谱-串联质谱色谱图参见附录B。 7.4液相色谱-串联质谱测定 7.4.1定性测定
在相同试验条件下进行样品测定时，检出的色谱峰的保留时间与标准样品相比，变化范围在土2.5%之内；并且在样品质谱图中，所选择的离子对均出现，而且所选择的相对离子对丰度与浓度相当的标准溶液相比，其允许相对偏差不超过表3规定的范围，则可定性确证目标分析物。
3 GB/T39873—2021
表3定性时相对离子对丰度的最大允许相对偏差
最大允许相对偏差
相对离子对丰度
% >50 20~50 10~20 ≤10
% ±20 ±25 ±30 ±50
7.4.2定量测定
本文件中液相色谱-串联质谱法采用外标-校准曲线法定量测定，应保证所测样品中被测组分的响应值在标准曲线范围内。 7.5 空自试验
除不加试样外，均按7.1～7.4的规定执行，
8结果计算
试样中各季铵盐含量的计算按式（1)计算：
X-exV
(1)
108+
m
式中： x p V m f 计算结果保留三位有效数字。
样品中各季铵盐的含量，单位为克每千克（g/kg）；从标准曲线查得样液中各季铵盐的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）样品定容体积，单位为毫升（mL）；样品质量，单位为克（g）；稀释倍数。
9精密度
在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的10%。
10 检出限和定量限
当取样量为1g，定容体积为100mL时，检出限为0.003g/kg，定量限为0.01g/kg。
4 GB/T39873—2021
附录A （资料性）
季铵盐的CAS号、分子式、相对分子质量
6种季铵盐的CAS号、分子式、相对分子质量见表A.1。
表A.1季铵盐的CAS号、分子式、相对分子质量
相对分子质量
分子式 Ca Has CIN Caa HaCIN Cas Has CIN Co Has CIN Chs Hs BrN Cae HaeBrNO
CAS号 139-07-1 13908-2 122-18-9 7173-51-5 1119-94-4 538-71-6
化合物名称
339.99 368.04 396.09 362.08 308.34 414.46
十二烷基二甲基莘基氯化铵十四烷基二甲基苄基氯化铵十六烷基二甲基芋基氯化铵
二葵基二甲基氯化铵十二烷基三甲基漠化铵
十二烷基二甲基-2-苯氧基-乙基溴化铵
0 GB/T39873—2021
附录B （资料性）
季铵盐的液相色谱-串联质谱色谱图
6种季铵盐的液相色谱-串联质谱色谱图见图B.1~图B.6。
5. 29
100 2
01
1.00 2.00 3.00 4.005.006.007.008.009.0010.00
时间/min
图B.1 十六烷基二甲基芙基氯化铵的液相色谱-串联质谱色谱图
4. 21
100
1.00 2.00 3.00 4.00 15.00 16.00 7.008.00 9.00 10.00
时间/min
图B.2 十二烷基二甲基-2-苯氧基-乙基漠化铵的液相色谱-串联质谱色谱图
4. 67
100
R
1.00 2.00 3. 00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00
时间/min
图B.3 十四烷基二甲基苄基氯化铵的液相色谱-串联质谱色谱图
3. 94
100
T
T
T
1. 00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00
时间/min
图B.4 二癸基二甲基氯化铵的液相色谱-串联质谱色谱图
6