第35卷，第12期 2015年12月
光谱学与光谱分析 Spectroscopy and Spectral Analysis
Vol. 35 ,No. 12 -pp3397-3401
December:2015
纤维素菌体残留物提取类腐殖质的红外光谱研究
王帅12，窦森*，张溪”，崔艳杰，王婷
1.吉林农业大学资源与环境学院，吉林长春130118 2.吉林农业科技学院植钧科学学院，吉林吉林132101
摘要微生物驱动下，纤维素分解及转化在腐殖质形成中具有重要作用。采用红外光谱辅以元素分析的技术手段对单一真菌(木霉、青霉和黑曲霉)及复合菌液体摇瓶培养70d后菌体残留物的类腐殖质(类胡敏酸HLA和类胡敏系结构进行广分析对比。结果表明：（1)两技术手段的结合有助于菌体残留物HLA分子结构的阐明，然而在表征残留物类Hu结构方面，尚需进一步探讨；（2)木霉有利于其所形成菌体残留物 HLA分子的缩聚作用，而青霉则更有利于该组分的降解；（3)青霉和复合菌对残留物HLA分子表现为氧化降解作用；（4)复合菌和黑曲霉均有助于培养液无机氮化合物向残留物HLA和类Hu组分中有机氮成分的
转移，促使其基C含量增加，为腐殖化进程提供氮源关键词纤维素：真菌：复合菌：菌体残留物：属殖质
中图分类号：S154.2文献标识码：A
引言
DOI: 10. 3964/j. issn. 1000-0593 (2015 )12-3397-05
手段对液体播瓶增养条件下、以纤维系为基质碳源所形成菌体残留物中类腐殖质(类胡敏酸和类胡敏素)的结构进行了系统研究。
纤维素是D-葡萄糖以3-1,4糖苷键所组成的大分子多
糖」，是维管束植物、地衣植物以及一部分藻类植物细胞壁的主要成分，其降解有助于90%的植物残体参与土壤有机质的形成与转化。自然界中，绝大多数纤维素可被真菌及细菌等微生物水解。
Xi等"报道指出，堆肥腐熟进程可分为三个阶段：（1）易被生物降解有机质的快速分解：（2)纤维系素和本质素等有机成分参与下的腐殖化进程及类腐殖质形成；（3)经转化有机物料的稳定阶段。其中，（2是堆肥成功与否的关键，而微生物活动在此过程中扮演着重要角色。微生物降解作用可促使木质纤维素类物质分解，使之释放多酚、糖类及氨基化合物等物质，这些物质的产生对于腐殖质的形成有促进作用3]
微生物在转化纤维素类物质方面的积极作用不可否认-6}，而不同微生物类群参与纤维素转化后，对腐殖质组分结构特征的影响尚不明确。鉴于此，为探明土壤典型真菌(木霉、青霉和黑曲霉)及复合菌参与下，纤维素分解及转化在离殖质形成中的作用，采用红外光谱辅以元系分析的技术
收稿日期：2014-10-15，修订日期：2015-02-04
1实验部分
菌株筛选及菌悬液的制备
1.1
从黑土(采自吉林农业大学校区长伊公路东侧台地、长期单一种植玉米的土壤耕层，43°48°44"N，125°23'45"E)中分离并纯化2株细菌、2株放线菌及3株真菌，经16srDNA及传统常规方法鉴定，供试细菌分别为枯草芽孢菌（Breribac-teriumsp）和巨大芽孢杆菌（Bacillusmegaterium）、放线菌为孢囊链霉菌（Streptosporangiumsp）和链霉菌（Streptomyces sp）、真菌为木霉（Trichodermariride）、青霉（Penicillium）和黑曲霉（Aspergillus niger）。
按照微生物类群，将细菌、放线菌及真菌菌株分别采用
牛肉营蛋白陈、高氏一号及马铃要葡萄糖琼脂增养基进行扩繁培养。在无菌操作环境，利用玻璃刮铲逐一将扩繁好的单一纯菌株从培养皿中刮取，滴加无菌水洗涤并收集悬液，制得单一菌株悬液。随后，将七种单一菌株悬液等比例混合，进而完成复合菌悬液的制备。
基金项目：国家自然科学基金项目（41401251），吉林省科技厅项目（20130206018NY），吉林农业科技学院种子基金项目（吉农院合字[2014]
第Z03号），博士启动基金项目（吉农院合字[2014］第B01号)资助
作者简介：王帅，1982年生，吉林农业科技学院植物科学学院讲师
*通讯联系人e-mail：dousen1959@126.com
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