NY/T 3464-2019
牛泰勒虫病诊断技术
Diagnostic techniques for bovine theileriosis
2019-1101 实施
2019-08-01发布
1 范围
本标准规定了环形套勒虫和素氏素勒虫的检测技术及其所引起的牛素约中病的诊断技术要求。
本标准适用于牛泰勒虫病病原检调及急性临床病例的诊断。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB19489 实验室生物安全通用要求
3 纳略语
下列缩略语适用于本文件。
PBS∶磷酸盐缓冲液（phosphate buffer solution）PCR∶聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）
4 材料与试剂
4.1 试剂
4.1.1 除特别规定外。在检测中使用的试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T 6682的要求，
4.1.2 姬姆萨《Giemsa）染色液原液（见附录 A中的 A.1）。
4.1.3 婀姆萨染色液工作液（见，A.2）。
4.1.4 甲醇。
4.1.5 香柏油。
4.1.6 2×Prernix Tag 酶混合液（商用》;包含DNA聚合酵、缓冲液和2.5 mmnol/L的dNTP混合物。4.1.7 无RNase水。
4.1.8 全血基因组提取试剂盒。
4.1.9 琼脂糖电泳级）。
4.1.10 1×TAE（见A.3）.
4.1.11 10 mg/mL溴化乙锭（EB）或同类核酸染料（见 A.4）。
4.1.12 环形泰勒虫阳性对照（用环形泰勒虫感染牛，染虫率达到5%以上时，提取血液基因组 DNA，稀释至1ng/μL）。
4.1.13 瑟氏秦勒虫阳性对照（用瑟氏泰勒虫感染牛，染虫率达到5%以上时，提取血液基因组 DNA，稀释至1 ng/μL.）.
4.1.14 泰勒虫阴性对照（筛选秦动虫阴性牛，提取血液基因组 DNA，稀释至1 ng/μL）。
4.2 耗材
4.2.1 载玻片。
4.2.2 抗凝真空采血管。
4.2.3 剪毛剪。
4.2.4 1.5mL无菌离心管，