NY/T 3480-2019
饲料中那西肽的测定高效液相色谱法
Determination of nosiheptide in feeds—High performance liquid chromatography
2019-11-01实施
2019-08-01发布
1 范围
本标准规定了饲料中那西肽组分 A 的高效液相色谱测定法。
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中那西肽组分A的测定。
本标准方法的检出限为0.2 mg/kg;定量限为0.5 mg/kg。
2 规范性引用文件
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GB/T603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的创备
GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/'T14699.1 饲料 采样
GB/T20195 动物饲料 试样的制备
3 原理
试样中的那西肽组分A用乙二胺四乙酸二钠溶液和 N，N-二甲基甲酰胺提取。离心后采用高效液相色谱仪-荧光检测器进行测定，并用外标法定量。4 试剂或材料
除特殊注明外，所用试剂均为分析纯.水应符合
GB/T 6682中一级水的规定1溶液按照
GB/T 603 的规定配制。
4.1 乙腈∶色谱饨。
4.2 N，N-二甲基甲酰胺。
4.3 那西肽标准品（以那西肽组分A计，含量≥88.6%）。
4.4 磷酸溶液;量取磷酸0.25 mL加水至1000 mL.摇匀。
4.5 乙二胺四乙酸二钠溶液（0.2 mol/L）;取乙二胺四乙酸二钠7.44 g∶加水溶解并稀释至100 mL。
4.6 流动相∶取磷酸溶液（4.4）570 mL，加乙腈（4.1）430 mL摇匀。
4.7 标准储备液∶称取那西肽标准品（4.3）约25 mg（精确至0.0l mg），置25 mL.棕色量瓶中，用N.N-二甲基甲酰胺配成浓度为1 mg/mL.的标准储备液，置一20℃保存，有效期为6个月。
4.8 标准工作液∶准确移取1mL标准储备液（4.7）于100 mL棕色量瓶中，用N，N-二甲基甲酰胺（4.2）稀释至刻度，揭匀。该溶液浓度为10 pg/mL置4℃保存。有效期为7d.
4.9 标准系列溶液∶分别吸取一定量的标准工作液（4.8），用N，N-二甲基甲酰胺（4.2）稀释成浓度为0.02 pg/mL0.05 μg/mL、0.1w/mL，0.5μg/mL、2.5μ/mL、5.0μg/mL、10.0 g/mL的标准系列工作溶液。现用现配。
4.10 有机滤膜∶0.45 μm。
5 仪器设备
5.1 高效液相色谱仪∶配有荧光检测器。
5.2 离心机;转速≥8000r/min。
5.3 分析天平∶感量0.01 mg、1 mg。