NY/T 3494-2019
农业生物质原料纤维素、半纤维素、木质素测定
Agricultural biomass raw materials—Determination of cellulose, hemicellulose, and lignin
2019-11-01 实施
2019-08-01发布
前 言
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。
本标准由农业农村部科技教育司提出并归口。
本标准起草单位;中国农业大学。
5.2.2 乙醇抽提
将 5.2.1水抽提后的抽提筒连接已干燥至恒重的接收瓶，由抽提器冷凝管上端加入190 mL 乙醇，于电热套上加热，使乙醇不断回流抽提（6次/h~10次/h），一般抽提16 h~24 h。抽提完成后，关闭加热套，将索氏抽提器冷却至室温。经两步抽提后的生物质试样（即不含抽提物试样）在（45±3）℃干燥箱中干燥至恒重，称量试样质量精确至0.1 mg。
5.3 两步法酸水解
5.3.1 坩埚恒重
将玻璃砂芯坩埚（G4）置于马弗炉中，在（575土25）℃下灼烧至恒重。将坩埚从马弗炉中取出后放入干燥器冷却，称量坩埚质量精确至0.1 mg。
5.3.2 浓酸水解
称取300.0 mg（精确至0.1 mg）不含抽提物试样至耐压试管，每个试样做2 次以上平行实验。向耐压试管中加入3.00 mL 72%硫酸溶液后立即混合均匀，将耐压试管放入（30±3）℃水浴中，5 min～10 min搅拌一次。恒温 60 min 后取出，向耐压试管中加入84.00 mL水，拧紧盖子混合均匀。
5.3.3 糖的回收率
用于计算回收率的糖标准溶液称为糖回收标准溶液，包括 D（十）葡萄糖、D（十）木糖、D（）半乳糖、IL （十）阿拉伯糖、D（十）甘露糖。糖回收标准溶液的糖浓度应该与检测试样的糖浓度接近。称量每种糖的质量精确至0.1 mg，放入耐压试管中，加入10.0 mL水，再加入348 μL 72%硫酸溶液，拧紧盖子混匀。用微孔过滤器过滤，分装于样品瓶中，冷冻储藏，使用时取出解冻并摇匀。
5.3.4 稀酸水解
将装有试样和糖回收标准溶液的耐压试管放人高压蒸汽灭菌器中.121℃水解1 h.待水解产物冷却至室温后，通过玻璃砂芯坩埚（G4）过滤，用锥形瓶收集滤液约 50 mL，转移至具塞容器0℃～4℃储藏，于24 h 内进行纤维素和半纤维素测定，6 h 内进行酸溶木质素的测定。
5.4 测定
5.4.1 酸溶木质素
使用
5.3.4 酸水解溶液，用紫外-可见分光光度计在320 nm处测量液体试样的吸光值。用水作紫外-可见分光光度计空白，用水稀释试样至吸光值为0.7～1.0.记录稀释倍数，记录吸光值精确到0.001。
5.4.2 酸不溶木质素
5.4.2.1 用大于50 mL的热水冲洗 100 mL具塞耐压试管中残留的酸不溶残渣，使残渣全部保留在玻璃砂芯坩埚（G4）中.并用真空过滤器抽干。在（105±3）℃烘干玻璃砂芯坩埚（G4）和酸不溶残渣至恒重，记录玻璃砂芯坩埚（G4）和酸不溶残渣质量，精确到0.1 mg。
5.4.2.2将玻璃砂芯坩埚（G4）及酸不溶残渣置于马弗炉中（575土25）℃灼烧至少3 h;直至所有有机物被灰化。升温速率控制在10℃/min，以防止试样燃烧以及强气流引起的试样机械损失。灰化结束后降温至 105℃，取出放入干燥器中冷却。称量坩埚和灰分质量精确到0.1mg。
5.4.3 碳水化合物
5.4.3.1 色谱条件
色谱柱∶聚苯乙烯二乙烯苯树脂铅型糖分析柱，配备相应除灰保护柱。