ICS 07.080
CCS B 41 13
河
北 省 地 方 标 准
DB 13/T 6008—2024
兽医实验室布鲁氏菌病检测生物安全防护
技术规范
2024 - 10 - 28 发布
2024 - 11 - 28 实施
河北省市场监督管理局 发 布
DB 13/T 6008—2024
前
言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规
定起草。
本文件由河北省农业农村厅提出。
本文件起草单位：河北省动物疫病预防控制中心、石家庄市动物疫病预防控制中心、百沃特（天
津）生物技术有限公司、唐山市动物疫病预防控制中心、沧州市动物疫病预防控制中心、河北省畜
牧兽医研究所、石家庄市纤维检验所、定州市农业农村局、石家庄市鹿泉区农产品综合质检站、石
家庄市农林科学研究院、张北县农业农村局。
本文件主要起草人：王振来、韩庆安、许玉静、李翀、杨若松、张腾帅、魏泽华、杜平丽、武瑞
栓、张涛、李钊、王琨、郝立宾、许亚改、苏洪军、肖娜、王珏、韦景平、李蕙、侯桂芳、殷克勇、
吴建利、刘志勇、陈公武、张丽花。
I
DB 13/T 6008—2024
兽医实验室布鲁氏菌病检测生物安全防护技术规范
1 范围
本文件规定了兽医实验室布鲁氏菌病检测生物安全防护的基本要求、技术要求、消毒、应急处
置及档案管理等要求。
本文件适用于兽医实验室布鲁氏菌病检测的生物安全防护。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用
文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）
适用于本文件。
GB 19489-2008 实验室 生物安全通用要求
GB 50346 生物安全实验室建筑技术规范
NY/T 541-2016 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范
NY/T 1948-2010 兽医实验室生物安全要求通则
NY/T 4302 动物疫病诊断实验室档案管理规范
《兽医实验室生物安全管理规范》（农业部令第302号）
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4 基本要求
实验室生物安全防护
4.1.1 布鲁氏菌病检测实验室建筑应符合 GB 50346 的规定。
4.1.2 实验室生物安全防护水平应符合 GB 19489-2008 中 4 的规定，见表 1。
表1 实验室生物安全防护水平
实验内容 实验室生物安全防护水平
布鲁氏菌病病原分离培养 BSL-3
动物感染实验 ABSL-3
未经培养的感染性材料实验 BSL-2
灭活材料实验 BSL-2
安全设备、实验室设施及个人防护
4.2.1 应符合《兽医实验室生物安全管理规范》、GB 50346 的规定。
4.2.2 BSL-3 生物安全实验室及 ABSL-3 动物生物安全实验室的个人防护装备穿脱操作流程按照附
录 A 执行。
人员
4.3.1 应符合 GB 19489-2008 中 7.14 的要求。
4.3.2 实验人员如皮肤、黏膜有开放性损伤应停止检测活动。
生物安全管理体系
应建立并执行生物安全管理体系，符合GB 19489-2008的规定。
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器材及耗材
应符合布鲁氏菌病样品采集、检测需要，对耗材应在使用前进行符合性验收。
5 技术要求
样品管理
应建立并执行样品管理程序，满足检测需要。样品的保存、包装与废弃物处理、采样记录、样
品运输按照NY/T 541-2016中7、8、9的规定执行。
安全操作
按照NY/T 1948-2010中附录B的规定执行。
污染物及废弃物处理
5.3.1 废弃物按照 GB 19489-2008 中 7.19 执行。
5.3.2 检测完毕的动物流产胎儿、胎衣、排泄物等污染物进行严格彻底的消毒和无害化处理。
6 消毒
物品
耐热耐湿的物品煮沸消毒30 min，或用流通蒸汽消毒30 min，或可采取高压灭菌蒸汽消毒；不耐
热的物品，用500 mg/L～100 0mg/L有效氯消毒剂浸泡60 min，或用1%过氧乙酸浸泡30 min。
仪器设备及台面
生物安全柜、离心机、实验台面用浸有75%酒精的纱布擦拭消毒、清洁，纱布用完后高压消毒处
理。
皮肤
实验操作前清洁双手，结束操作后，手部可用0.1%新洁尔灭、75%酒精或含酒精的手部消毒剂进
行消毒。
工作间
室内空气可先用4000 mg/L过氧乙酸作用1h、用量20 mL/m
3喷雾消毒，或用紫外线进行直接照射不
少于30 min。
常用消毒剂及消毒方式
不同消毒对象常用消毒剂及消毒方式见附录B。
7 应急处置
应制定应急处置预案，并按照NY/T 1948-2010附录E的规定执行。
8 档案管理
应符合NY/T 4302的规定。
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附 A A A
录
（规范性）
生物安全三级实验室个人防护装备穿脱操作流程
A.1 目的
使所有进出生物安全三级实验室的人员严格做好个人防护，避免发生人员暴露感染。
A.2 适用范围
进出生物安全三级实验室的人员穿脱个人防护装备。
A.3 职责
A.3.1 进出生物安全三级实验室防护区的所有人员应按照本文件执行。
A.3.2 实验室安全监督员负责监督有关人员按照规程执行。
A.4 操作规程
A.1.1 进入核心工作间
A.4.1.1 刷卡后进入第一更衣室，脱去外衣，换穿内工作衣、软底工作鞋。
A.4.1.2 在第二更衣室依次穿戴：
a) 戴内层手套，并封住袖口；
b) 穿一次性防护服（不拉拉链）；
c) 一次性帽子（护住所有头发，短发可不戴）；
d) 戴 N95 口罩；
e) 穿一次性防护服的帽子，拉上拉链贴好胶条，注意领口的封闭性；
f) 戴外层手套，并封住防护服袖口；
g) 戴防护眼镜（正压防护头罩，适用时）；
h) 穿一次性半高筒靴套，完全遮住踝部、扎紧；
A.4.1.3 穿戴完毕后，依次进入内走廊、缓冲间、核心工作间。
A.4.2 退出核心工作间
A.4.2.1 工作完毕退出核心工作间前，先将污物在实验室内打包，在医用垃圾袋内放入消毒指示卡，
用压力蒸汽灭菌封包胶黏带将医用垃圾袋扎口封口（需要留通气孔），用喷雾消毒壶喷雾消毒。用消
毒剂喷洒手部、脚、腿及身体进行消毒。
A.4.2.2 在内走廊依照下列步骤进行：
a) 将实验废弃物放入双扉灭菌器中，确认消毒程序正常，进行消毒；
b) 用消毒剂喷脚、腿、身体及手部进行消毒，摘防护眼罩（正压防护头罩，适用时），解开
防护服封条，脱外层手套， 脱一次性防护服、靴套， 喷洒消毒剂后放入医用垃圾袋中，
放置一张消毒指示卡，用压力蒸汽灭菌封包胶黏带将医用垃圾袋扎口（需要留通气孔），
待下次实验进入时高压；
c) 用消毒剂喷手部和脚部进行消毒，进入第二更衣室。
A.4.2.3 在二更内依照下列步骤进行。
a) 摘 N95 口罩,脱一次性帽子、手套，喷洒消毒剂后放入医用垃圾袋中，放置一张消毒指示卡，
用压力蒸汽灭菌封包胶黏带将医用垃圾袋扎口（需要留通气孔），待下次实验进入时高压；
b) 消毒洗手后，进入淋浴间沐浴。然后进入第一更衣室更衣，出实验区。
A.4.3 穿手套方法及注意要点
A.4.3.1 检查手套有效期、尺码；
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A.4.3.2 检查手套气密性；
A.4.3.3 内层手套应压紧内工作服袖口，外层手套应压紧一次性防护服袖口。
A.4.4 脱手套方法及注意要点
A.4.4.1 用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘；
A.4.4.2 将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；
A.4.4.3 用戴着手套的手拿住该手套；
A.4.4.4 用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内部；
A.4.4.5 脱下该手套使其内面向外并形成个由两个手套组成的袋状；
A.4.4.6 丢弃在医用袋中进行消毒处理。
图A.1 手套的带脱示意图
A.5 穿摘口罩方法及注意要点
A.5.1 检查口罩有效期、型号、尺码；
A.5.2 拉伸测试口罩头带；将手穿过口罩头带，金属鼻位向前。
A.5.3 一只手托着口罩，扣于面部适当的部位，将上端头带拉上，放于头后，然后将下端头带拉过
头部，至于头后，并调校口罩至舒适位置；
A.5.4 将双手指尖沿着鼻梁金属条，由中间至两边，慢慢向内按压，直至紧贴鼻梁；
A.5.5 测试佩戴是否合适（转头、嘴部运动）；
A.5.6 深呼吸检查气密性，将双手尽量遮盖口罩并进行测试。（以双手遮着口罩，然后大力的呼吸。
如空气从口罩边缘溢出，表示佩戴不当，必须再次调校头带及鼻梁金属条）。
A.5.7 摘口罩过程中双手不接触面部任何部位，同时避免触碰口罩外表面，先摘下头带再摘上头带，
用手仅捏住口罩的系带放入专用的灭菌袋中进行高温高压处理。
A.6 穿脱防护服方法及注意要点
A.6.1 检查防护服有效期、型号、尺码；
A.6.2 穿防护服时袖口被手套压紧，裤脚被靴套扎紧，粘好胶条。
A.6.3 脱防护服时轻轻由内向外反脱，将内面朝外卷，脱裤子时连带鞋套一起脱去。
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附 B B B
录
（资料性）
不同消毒对象常用消毒剂及消毒方式
不同消毒对象常用消毒剂及消毒方式见表B.1。
表B.1 不同消毒对象常用消毒剂及消毒方式
消毒部位 消毒剂或消毒方式 消毒优点 消毒缺点
物品 耐热耐湿的物品可煮沸或蒸汽消毒 30 min 方便、有效 一次性消毒物品量受限
500 mg/L～1000 mg/L 有效氯消毒剂 浸泡 60 min 成本低、效果可靠 对金属物品具有腐蚀性，有刺 激性
1%过氧乙酸浸泡擦拭消毒 30 min 效果可靠 对金属物品具有低腐蚀性，有 刺激性
仪器设备及 台面 75%酒精消毒 成本低，方便、有效 有刺激性，消毒时要保证房间 通风
皮肤 0.1%新洁尔灭 杀菌力强、作用快 忌与肥皂及碱性消毒剂同时使 用
75%酒精或含酒精的手部消毒剂 成本低，方便、有效 有刺激性，消毒时要保证房间 通风
工作间 4000 mg/L 过氧乙酸 杀菌力强、作用快 有刺激性、对金属有腐蚀作用
紫外线直接照射消毒 有效、便捷 有使用寿命
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