ICS 65.160
CCS B 35
0853
云 南 省 地 方 标 准
DB53/T 1301—2024
烟草花粉收集与贮藏技术规程
2024-08-14发布 2024-11-14实施
云南省市场监督管理局 发 布
DB53/T 1301—2024
前 言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。
本文件由云南省烟草专卖局（公司）提出。
本文件由云南省烟草标准化技术委员会(YNTC12)归口。
本文件起草单位：玉溪中烟种子有限责任公司、中国烟草总公司云南省公司、中国烟叶公司、云南省烟草农业科学研究院、云南大学。
本文件主要起草人：张立猛、潘磊、尤辉、黄晓东、陈云松、吴家昶、郑昀晔、邓盛斌、许杰、杨帅、牛永志、廖菊够、肖江海、陈连红、耿世兵、薛大章、周东洁、索文龙。
I
DB53/T 1301—2024
烟草花粉收集与贮藏技术规程
1 范围
本文件规定了烟草花粉收集方法、贮藏的质量要求、检测方法、贮藏样品编码规则和分装与贮藏方法等内容。
本文件适用于烤烟、晒烟、晾烟、野生烟草的花粉收集和贮藏。其他茄科类植物参照执行。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 18771（所有部分） 烟草术语
GB/T 19258.1 杀菌用紫外辐射源 第1部分：低气压汞蒸气放电灯
GB/T 19258.2 杀菌用紫外辐射源 第2部分：冷阴极低气压汞蒸气放电灯
GB/T 21138 烟草种子
GB/T 24308 烟草种子生产加工技术规程
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
含蕾期 budding period
花冠充分生长到最长，但顶端尚密闭的时期。
3.2
花始开期 initial flowering period
花冠顶端开裂至花冠开放至直径最大前的时期。
3.3
花粉净度 pollen purity
除去杂质或发育不完全的花粉后，剩余花粉粒数占受检验样品总粒数的百分比。
3.4
花粉萌发率 pollen germination rate
花粉管长度超过花粉粒直径的花粉粒数占受检花粉粒数的百分比。
3.5
花粉贮藏单元 storage unit of pollen
花粉贮藏的最小封装单元。
1
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4 花粉收集
4.1 烟株种植
4.1.1 种子选择
选用符合GB/T21138规定的原种进行种植，用于收集花粉。
4.1.2 地点选择
花粉生产地点选择按GB/T 24308规定执行。
4.1.3 隔离要求
不同烟草种质直线种植距离应保持500 m以上，花粉收集专人操作，应避免工具混用。
4.1.4 田间管理
花粉生产烟株田间管理按GB/T 24308规定执行。
4.2 花朵采集
采集含蕾期至花始开期（图示见附录A）的花朵，避免花朵沾染雨水和露水。
4.3 花药收集
将花药从花朵雄蕊上分离，宜用16日筛网筛除杂质，收集位于每网上层的花药。
4.4 花药晾制
花药收集后30min内，将摊薄至单层的花药置于室内温度25/0-28℃、相对湿度30%-40%环境下晾至花药裂开，花粉散出，晾制时间不超过24h.避免阳光直晒。
4.5 花粉筛分
用40目筛网筛分出花粉，收集位于筛网下层的花粉。
5 花粉分装与贮藏
5.1 花粉分装
将花粉净度≥90.0%、花粉萌发率≥50.0%、含水量5.0%-7.0%的花粉置于操作台面上分装为花粉贮藏单元。操作台面杀菌灭活按GB/T 19258.1和GB/T 19258.2执行。
5.2 贮藏标识
分装好的贮藏单元参照贮藏编码规则（附录B）进行样本编码，粘贴标签后根据贮藏时限要求放入对应贮藏区域。
5.3 花粉贮藏
2
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短期贮藏（3个月内）的花粉密封存放于离心管或玻璃瓶中，置于4℃±1℃温度环境下，花粉贮藏单元为10 g/单元。
中期贮藏（5年以内）的花粉密封存放于低温冻存管中，置于-80℃±1℃温度环境下，花粉贮藏单元为0.5g /单元。
长期贮藏（5年以上）的花粉密封存放于低温冻存管中，置于液氮环境下，花粉贮藏单元为0.5g/单元。
きひ前麻
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附 录 A
（规范性）
烟草花朵发育时期形态特征
花朵采集应符合图A.1中时期7和时期8的形态特征。其中：
时期7形态特征：花冠充分生长到最长，但顶端尚密闭。
时期8形态特征：花冠顶端开裂至花冠开放至直径最大前。
8
7
6
5
4
3
2
1
9
注：根据标准技术团队前期实践，结合细胞显微结构观察结果，将烟草花朵发育时期定为8个时期。其中时期1为小孢子母细胞阶段，小孢子母细胞还包裹在临时性组织胼胝质壁内；时期2花粉减数分裂完成，小孢子从四分体中释放出来，形成游离小孢子：时期3小孢子完成一次有丝分裂，形成二核花粉，小孢子细胞形成完整的细胞壁，细胞膜形态较时期1清晰，细胞质中沉积部分淀粉粒：时期5及时期6花粉细胞内含物进一步增多，胞质中沉积大量的淀粉体、脂质体和蛋白体，细胞膜电子透明化，萌发孔处仅沉积细胞内壁，细胞膜完整，该时期花粉细胞内含物和细胞结构发育充分；时期7至时期8形成成熟花粉，时期8花粉开始脱水。
图A.1烟草花朵发育时期形态特征示意图
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附 录 B
（资料性）
花粉贮藏单元编码规则
花粉贮藏单元编码共16位数字，其中：
———第1~2位数字代表烟草类别，按GB/T 18771规定执行。即：10: 烤烟、20: 晒烟、31: 白肋烟、32: 马里兰烟、33: 雪茄烟、40: 香料烟、50: 野生烟草：
———第3位数字代表亲本来源，1：审（认）定品种、2：国内种质资源、3：国外种质资源，4:其它：
———第4~7位数字代表序号，按该亲本入库先后顺序进行编码，从0001开始：
———第8~11位数字代表花粉收集年份，如“2016”表示收集年份为2016年；
———第12位数字代表花粉贮藏温度,1: -196℃、2: -80℃、3:4℃;
———第13位数字代表当年度花粉收集批次，1：第1批、2：第2批……9：第9批：
———第14~16位数字表示同一批次下花粉贮藏单元序号，001：第1号。
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