ICS 65.020.30
CCS B 43 4114
商
丘 市 地 方 标 准
DB 4114/T 261—2024
平原地区黄牛冷冻精液人工授精技术规程
2024 - 10 - 10 发布
2024 - 11 - 10 实施
商丘市市场监督管理局 发 布
DB 4114/T 261—2024
目
次
前言 ................................................................................. II
1 范围 ............................................................................... 1
2 规范性引用文件 ..................................................................... 1
3 术语和定义 ......................................................................... 1
4 冷冻精液保存与解冻 ................................................................. 1
4.1 保存 ........................................................................... 1
4.2
解冻 ........................................................................... 1
5 发情鉴定 ........................................................................... 2
5.1 外部观察法 ..................................................................... 2
5.2 直肠检查法 ..................................................................... 2
5.3
B 超检查法 ...................................................................... 2
6 药品器械及消毒 ..................................................................... 2
6.1 消毒药品 ....................................................................... 2
6.2 器械 ........................................................................... 2
6.3
输精器械消毒 ................................................................... 2
7 输精 ............................................................................... 2
7.1 输精时间 ....................................................................... 2
7.2 输精准备 ....................................................................... 2
7.3
直肠把握深部输精法 ............................................................. 2
8 配种登记和饲养管理 ................................................................. 3
8.1 配种登记 ....................................................................... 3
8.2
饲养管理 ....................................................................... 3
9 妊娠诊断 ........................................................................... 3
9.1 外部观察法 ..................................................................... 3
9.2 直肠检查法 ..................................................................... 3
9.3 B 超诊断法 ...................................................................... 3
I
DB 4114/T 261—2024
前
言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由商丘市农业农村局提出并归口。
本文件起草单位：永城市畜牧发展服务中心、永城市市场监督管理局、商丘市动物检疫与疫病预防
控制中心。
本文件主要起草人：黄锋、陈龙飞、刘凯、何连海、李超、侯登平、赵红权、赵谦、侯登坤、王磊、
杨光、何向楠。
II
DB 4114/T 261—2024
平原地区黄牛冷冻精液人工授精技术规程
1 范围
本文件规定了冷冻精液保存与解冻、母牛发情鉴定、器械及消毒、输精操作、母牛妊娠诊断、记录
和饲养管理。
本文件适用于商丘区域黄牛冷冻精液人工授精操作。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
GB 4143 牛冷冻精液
GB/T 5458 液氮生物容器
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
人工授精
人为借助专门器械，将采集的种公牛精液经检查、稀释、保存等处理合格后，输入到发情母牛生殖
道内,使其妊娠的一种繁殖技术。
3.2
发情鉴定
根据母牛发情时的行为、生殖器官等生理方面的变化判断母牛发情状态的方法。
4 冷冻精液保存与解冻
4.1
保存
冷冻精液应贮存于装有足够液氮的生物容器中，并定期检查和及时添加液氮，保证冷冻精液浸没于
液氮中。液氮罐的使用应符合 GB/T 5458 规定。
4.2
解冻
4.2.1 冷冻精液人工授精前应按 GB 4143 规定进行精液品质检查。解冻后精子活力≥40%，方能使用。
4.2.2 取冻精时，盛放冻精的提斗不能超过液氮罐的颈部，精液在空气中的停留时间不超过 5 秒。
4.2.3 细管冻精解冻时直接将细管投入 36 ℃～38 ℃温水中，10 s～15 s 后取出。
4.2.4 解冻精液在输精前应保存在 17 ℃～20 ℃温度下，以保持精液的活力。解冻后应尽快输精，最
迟不能超过 2 h。
1
DB 4114/T 261—2024
5 发情鉴定
5.1
外部观察法
母牛兴奋不安，哞叫，游走，食欲减退；阴户肿胀，从阴门流出大量透明、粘稠的黏液，且牵缕不
断；母牛静立主动接受试情公牛或同圈舍母牛爬跨等，可认定为发情。
5.2
直肠检查法
直肠检查卵泡体积增大、有波动感，卵泡弹性较好，且两侧卵巢体积差别明显，可鉴定为发情。
5.3
B 超检查法
B超检查是通过B超探头对卵巢及卵泡发育进行视频观察，若发现卵巢上有成熟卵泡即可输精。
6 药品器械及消毒
6.1
消毒药品
75%酒精、0.1%高锰酸钾溶液。
6.2
器械
输精枪、一次性输精枪外套、长臂塑料手套、长镊子（20 cm以上）、精液剪、水浴锅、温度计、
消毒纱布或毛巾。
6.3
输精器械消毒
6.3.1 输精前消毒
精液剪、输精枪等清洗干净后再用 75%酒精擦拭消毒备用。
6.3.2 输精后消毒
输精枪用后及时清洗、消毒，放置于干燥处。每输配一头母牛，使用一只输精枪，并采用一次性塑
料外套管。
7 输精
7.1
输精时间
发现母牛主动接受爬跨后6 h ～10 h或卵泡壁变薄、波动感明显、接近成熟排卵时进行输精，一个
发情期输精2 次的，其间隔时间为8 h～12 h。青年牛输精时间稍推迟2 h ，老年牛输精时间提前2 h 。
7.2
输精准备
将发情牛牛尾一侧固定，充分暴露外阴，用 0.1%高锰酸钾溶液清洗外阴后再用生理盐水擦拭干净。
7.3 直肠把握深部输精法
2
DB 4114/T 261—2024
配种员手臂戴上一次性塑料长臂手套，用干净温水沾湿或涂少量润滑油，手呈锥形旋转伸入直肠寻
找把握子宫颈。并用伸入直肠的手臂压开阴门裂，另一只手持输精管由阴门缓慢插入，先斜向上再转成
水平，双手配合，使输精管缓缓进入子宫颈深部，慢慢注入精液。输入精液后再缓慢旋转抽出输精枪。
8 配种登记和饲养管理
8.1
配种登记
配种完成后做好记录，登记表见附录A。
8.2
饲养管理
配种后加强母牛饲养管理，仔细观察采食、运动等日常行为，注意是否再次发情；充分利用平原地
区农作物秸秆丰富优势，推广使用本地全株玉米青贮、花生秧等优质青、干作物秸秆。
9 妊娠诊断
9.1
外部观察法
妊娠母牛早期表现为 1 个发情期不再发情，配种 2 个月以后行动谨慎，食欲增加，被毛光亮，膘
情好转。
9.2
直肠检查法
直肠检查应详细记录两侧卵泡的位置及卵泡发育情况。配种后 10 d～14 d 做第 1 次记录，原卵泡
发育处形成柔软的初级黄体，对卵巢及黄体的大小、形状予以记录。再过 10 d，做第 2 次记录，卵巢
体积成倍增大，表面光滑、质地柔软，有弹性，黄体略为明显，突出于卵巢表面，比第一次检查时稍硬，
根据这些变化即可诊断为妊娠。若第 2 次记录时发现原来增大的卵巢体积缩小，即定为未孕。
9.3
B 超诊断法
在最后一次配种20 d后用7.5 Hz直肠探头对母牛子宫进行探查胚泡的形成和卵巢的妊娠黄体形成情
况， 45 d～60 d重复检查1 次 。
3
DB 4114/T 261—2024
附 A A A
录
（规范性）
配种登记表
配种登记表见表A.1。
表A.1 配种登记表
序号 畜主 母 牛 耳 标 号 母 牛 年龄 母 牛 胎次 发 情 时间 首 配 时间 冻 精 细 管 号 复 配 时间 是 否 怀孕 预 产 日期 产 犊 日期 输 精 人员 备注





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