ICS 17.180. 99 N 52
7 1
-
中华人民共和国国家标准
GB/T 26792—2011
高效液相色谱仪 High performance liquid chromatography
2011-12-01实施
2011-07-29发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会 发布 GB/T26792—2011
高效液相色谱仪
1范围
本标准规定了高效液相色谱仪的要求、试验方法、检验规则和标志、包装、运输及贮存、质量保证等。 本标准适用于高效液相色谱仪（以下简称仪器）。 本标准不适用于专用仪器。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T191—2008包装储运图示标志（ISO780：1997，MOD) GB/T2829一2002周期检验计数抽样程序及表（适用于对过程稳定性的检验） GB/T11606—2007 分析仪器环境试验方法 GB/T12519—1990 分析仪器通用技术条件 GB/T15464--1995 仪器仪表包装通用技术条件
3要求 3.1正常工作条件
仪器的正常工作条件： a) 环境温度：5℃~35℃； b) 相对湿度：20%~80%， c) 供电电源：电压220V土22V，频率50Hz士0.5Hz； d）室内应避免易燃、易爆和强腐蚀性气体及强烈的震动、电磁干扰和空气对流等； e）接地良好。
3.2外观 3.2.1仪器外表应光洁平整、字迹清晰，表面涂覆色泽均匀、不应有明显划伤、露底、裂纹、起泡等现象。 3.2.2各调节旋钮、按键、开关等工作正常，无松动；指示、显示清晰完整。 3.3输液泵 3.3.1密封性
输液泵流路截止，压力达到上限值的90%，输液泵停止运行，保持10min，压力下降应不大于 5 MPa。 3.3.2流量输出误差及稳定性
泵流量输出误差及稳定性见表1。
表1 泵流量输出误差及稳定性
流量输出误差
流量稳定性
流量设定值 mL/min
% ≤1. 5 ≤1. 0 ≤1. 5
% ±2 ±1 ±2
0. 1 1. 0 2. 0
1 GB/T26792—2011
表1（续）流量输出误差
流量设定值 mL/min
流量稳定性
% ±3 ±3 ±5
% ≤1.5 ≤1.5 ≤2.0
5. 0 10. 0 30. 0
3.3.3梯度误差
梯度误差应不超过土2%。 3.4色谱柱恒温箱 3.4.1温度设定值误差
温度设定值误差应不超过十2℃，
3.4.2控温稳定性
控温稳定性应不大于1℃。
3.5检测器 3.5.1紫外-可见可变波长检测器 3.5.1.1波长示值误差
波长示值误差应不超过士2nm。 3.5.1.2波长重复性
波长重复性应不大于1nm。 3.5.1.3吸光度误差
吸光度误差应不超过士5%。 3.5.1.4静态基线漂移及静态短期基线噪声
静态基线漂移应不大于5×10-*AU/h；静态短期基线噪声应不大于3×10-5AU。
3.5.1.5动态基线漂移及动态短期基线噪声
动态基线漂移应不大于1×10-3AU/h；动态短期基线噪声应不大于5×10-5AU。
3.5.1.6最小检测浓度
最小检测浓度应不大于4×10-°g/mL。 3.5.1.7线性范围
线性范围应不小于10*。 3.5.2示差折光检测器 3.5.2.1基线漂移及短期基线噪声
基线漂移应不大于5×10-7RIU/h；短期基线噪声应不大于5×10-9RIU。
3.5.2.2最小检测浓度
最小检测浓度应不大于5×10-g/mL。 3.5.2.3线性范围
线性范围应不小于10*。 3.5.3荧光检测器 3.5.3.1波长示值误差及波长重复性
波长示值误差应不超过士5nm；
2 GB/T26792—2011
波长重复性应不大于2nm。 3.5.3.2基线漂移及短期基线噪声
基线漂移应不大于5×10-3FU/h；短期基线噪声应不大于5X10-4FU。
3.5.3.3最小检测浓度
最小检测浓度应不大于1×10-"g/mL。 3.5.3.4线性范围
线性范围应不小于10°。 3.6整机性能 3.6.1定性测量重复性
定性测量重复性应不大于0.5%。 3.6.2定量测量重复性
定量测量重复性应不大于3.0%。 3.7安全 3.7.1绝缘电阻
仪器在正常工作条件下，绝缘电阻应大于20Mα。 3.7.2绝缘强度
仪器在正常工作条件下，应能承受1500V交流有效值连续1min的电压试验，不应出现飞弧或击穿现象。 3.7.3泄漏电流
仪器在正常工作条件下，泄漏电流应不大于5mA。 3.8成套性
按具体仪器标准规定。 3.9运输、运输购存
仪器在运输包装状态下，按GB/T11606一2007的2.4试验项目中的低温贮存试验，高温贮存试验和跌落试验的项目进行试验。其中高温55℃；低温一40℃（一20℃）；倾斜跌落高度250mm。试验完成后，将仪器置于正常工作条件下进行试验，应符合3.3～3.7要求。
注：低温贮存一20℃一档不推荐使用，仅用于带液晶显示器类的仪器（当它的贮存、运输温度为一20℃时）。 4试验方法 4.1试验条件
仪器的试验条件为： a）本试验均应在3.1规定的条件下进行； b) 试验过程中室温变化不超过3℃（示差折光检测器室温变化不超过2℃）； c）试验用计量器具应经计量检定合格或计量检定单位校准； d) 仪器试验前应开机预热1.5h；
标准溶液与试剂：试验用标准溶液均应使用经国家批准的标准溶液进行逐级稀释。所用流动
e)
相为HPLC级，经过脱气处理。其他试剂为分析纯，水为二次蒸馏水。
4.2外观
目视和手动检查。
3 GB/T26792——2011
4.3输液泵 4.3.1密封性 4.3.1.1设备及试剂
包括： a）高压截止阀一个：耐压不小于60MPa； b） 精密压力表一块：量程不小于60MPa、0.4级； c) 秒表一块：分度值不大于0.155 d）三通一个； e）二次蒸馏水。
4.3.1.2试验程序
将输液泵通过三通与高压截止阀及精密压力表连接，输液泵最高压力设定在压力上限值90%处，
以二次蒸馏水为流动相，待系统排出气体，流量设为0.1mL/min，启动输液泵，将高压截止阀处于截流状态，压力将逐渐上升，达到输液泵压力上限值90%时，输液泵停止运行，记录此时压力表示值，保持 10min后，记录压力表示值。
按式(1)计算压力下降值：
=pp2
(1 )
式中： Ap—压力下降值，单位为兆帕(MPa)； p1—-达到上限值90%时的压力表示值，单位为兆帕(MPa)； P2" 停泵10min后压力表示值，单位为兆帕（MPa）。
4.3.2 流量输出误差及稳定性 4.3.2.1设备及试剂
包括： a） 秒表一块：分度值不大于0.1s； b) 带探针数字温度计一支：分度值不大于0.1℃； c) 分析天平一台：根据测试流量大小选择合适载荷、测试质量尽量在天平载荷的60%左右、准确
度不低于①级、实际标尺分度值不大于0.1mg； d) 背压装置一个：在设定流量下可提供8MPa士2MPa的背压； e) 合适规格的称量瓶三个； f）二次蒸馏水。
4.3.2.2试验程序
用仪器专用管路连接输液泵的出口、人口，出口适当加一背压（8MPa士2MPa），以二次蒸馏水为流动相，将数字温度计探针插入流动相内，测量此时流动相的试验温度。设定合适流量，待输液泵运行稳定后，按表1分别设定流量，在流动相排出口用事先清洗并称重过的称量瓶收集流动相，同时用秒表计时，待达到表2规定的收集时间后停止收集流动相，并按下秒表停止计时。每个流量下各测试三次。 分别按式（2）、式（3)计算流量输出误差及稳定性。
序。 - F × 100% F, Fm- Frmn ×100%
S.=
( 2)
SR
-(3 )
F.
式中： S, 流量输出误差%； SR— 流量稳定性%；
4 GB/T 26792—2011
Fm Fm=（W，一W,)/(pt），流量实测值，单位为毫升每分钟（mL/min）； W, 称量瓶重量，单位为克（g)； W2 称量瓶十流动相重量，单位为克（g)；
试验温度下流动相的密度，单位为克每毫升（g/mL）；收集流动相的时间，单位为分钟（min）；
p t
F.- 同一设定流量三次测量的平均值，单位为毫升每分钟（mL/min）： F. 流量设定值，单位为毫升每分钟（mL/min）； Fmax 同一设定流量三次测量的最大值，单位为毫升每分钟（mL/min）)； Fmin 同一设定流量三次测量的最小值，单位为毫升每分钟（mL/min）。 注：流量的设定可根据输液泵的流量范围而定。流量测量顺序可以任意选择。
-
表2泵流量试验收集时间要求
流量设定值 mL/min ≤1. 0 1.0~10.0 ≥10.0
收集流动相时间
min 10~15 5 3
4.3.3 梯度误差
4.3.3.1 设备及试剂
包括： a) 紫外检测器一台； b) 色谱数据工作站（或记录仪)一台； c) 背压装置一个：设定流量下可提供8MPa土2MPa背压， d) 两通一个； e) 流动相：A通道溶液：二次蒸馏水；B通道溶液：0.1%丙酮/水溶液。
4.3.3.2 试验程序
将紫外检测器波长设定在254nm。 泵出口适当加一背压（8MPa土2MPa)并通过两通连接到检测器。1 色谱数据工作站（或记录仪)与检测器信号输出端连接，按表3设置梯度参数，梯度设置示意图见图1。输液泵流量设为1.0mL/min，待仪器稳定后，开始采集数据，得到梯度曲线。测量各种溶液配比时的输出信号值，用式(4)计算各种溶液配比时的梯度误差，重复两次，取其中最大者为输液泵梯度误差，梯度误差计算示意图见图2。
表3 梯度参数设置
A通道 % 100 80 60 40 20 0 100
B通道 % 0 20 40 60 80 100 0
序号 1 2 3 1 5 6 7
5 GB/T26792——2011
100%B 0%A
输出信号
80%B
60%B
40%B
20%B
0%B 100%A
时简，
图1 梯度设置示意图
4.3.3.3 梯度误差的计算
V; -VA ×100% VB-VA
Tα= Lu--
(4)
式中： T 第i段梯度误差%，i=1，2.3，4； Li- 第i段设定梯度值%，=1，2，3，4； VA A通道流动相100%时输出信号值； Vs" B通道流动相100%时输出信号值； V 第i段梯度输出信号值，i=1，2，3，4。
-
输出信号
B/%
Vshha 100
80
ptodinongokel
V
60
aaV
40
20
V
1o 时间！
图2 梯度误差计算示意图
6 GB/T26792—2011
4.4色谱柱恒温箱 4.4.1温度设定值误差与控温稳定性 4.4.1.1试验设备
带探针数字温度计一台：分度值不大于0.1℃。 4.4.1.2试验程序
将数字温度计探针固定在色谱柱恒温箱内放置色谱柱处，选择室温加10℃和最高可控温度的 90%两点进行测量。按温度从低到高顺序升温，当温度显示值稳定后，每隔5min记录一次温度计显示温度，共七次，求出平均值。平均值与设定值之差为该温度下的设定值误差，七次读数中最大值与最小值之差为该温度下的控温稳定性。选取测试结果中的最大值，作为本台色谱柱恒温箱的温度设定值误差及控温稳定性。 4.4.1.3温度设定值误差及控温稳定性的计算
温度设定值误差按式（5)计算；控温稳定性按式（6)计算：
AT,=T-T。 T, =Tmx - Tmin
...( 5 ) ....(6)
式中： AT, 温度设定值误差，单位为摄氏度（℃）； T 七次测量的平均值，单位为摄氏度（℃）； T.- 温度设定值，单位为摄氏度（℃）； T— 控温稳定性，单位为摄氏度（℃）； Tmx 七次测量最大值，单位为摄氏度（℃）； Tmin——七次测量最小值，单位为摄氏度(℃）。
4.5检测器 4.5.1紫外-可见可变波长检测器 4.5.1.1波长示值误差 4.5.1.1.1设备及试剂
包括： a）色谱数据工作站（或记录仪)一台； b)）车 输液泵一台； c）1mL注射器一支； d) 两通一个； e）紫外波长标准溶液：特征波长为235nm、257nm、313nm、350nm，配制方法参见附录A； f）紫外波长标准溶液空白液：0.05mol/L硫酸溶液，配制方法参见附录A。
4.5.1.1.2试验程序
将检测器和色谱数据工作站（或记录仪）连接好，开机预热稳定后，选取合适带宽，用1mL注射器
向检测池内注入紫外波长标准溶液空白液（充满检测池），待检测器示数稳定后，在（235土5）nm、（257士 5)nm、（313士5)nm、（350士5)nm的各波长下均将检测器示数回零。之后再用1mL注射器向检测池内注人紫外波长标准溶液（充满检测池）至示数稳定，例如检定257nm时，从252nm开始到262nm，每0.5min改变1nm，这样将得到一组不同波长处的响应信号值，最高（或最低）值对应的波长与标准溶液特征波长示值之差，即为检测器在该波长处的波长示值误差（如图3)。按此方法依次检验235nm、 257nm、313nm、350nm处的波长示值误差，取其中最大值为检测器波长示值误差。
注1：如有波长扫描程序，可直接扫描紫外波长标准溶液光谱图（注意扣空白），谱峰最高或最低时的波长值与标准
7